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点样法

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点样法在多聚物的设计方面与原位合成技术相似。只是合成工作用传统的 DNA 多肽合成仪 PCR 扩增或体内克隆等方法完成。大量制备好的核酸探针、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自动化微量点样装置将其以较高密度互不干扰地印点于经过特殊处理的玻片、尼龙膜、硝酸纤维素膜上,并使其与支持物牢固结合。支持物需预先经过特殊处理,例如多聚赖氨酸或氨基硅烷等。亦可用其它共价结合的方法将这些生物大分子牢牢地附着于支持物上。现在已经有比较成型的点样装置出售,例如美国 Biodot 公司的“喷印”仪以及 Cartesian Technologies 公司的 Pix-Sys NQ/PA 系列“打印”仪。这些自动化仪器依据所配备的“打印”或“喷印”针将生物大分子从多孔板吸出直接“打印”或“喷印”于芯片片基上。“打印”时针头与芯片片基表面发生接触而“喷印”时针头与片基表面保持一定的距离 [1] 。所以,“打印”仪适宜制作较高密度的微阵列(例如 2500 /cm2 ),“喷印”法由于“喷印”的斑点较大,所以只能形成较低密度的探针阵列,通常 400 /cm2 。点样法制作芯片的工艺比较简单便于掌握、分析设备易于获取,适宜用户按照自己的需要灵活机动地设计微点阵,用于科研和实践工作。 目前,除了在生物芯片研制方面享有盛誉的 Affymetrix 公司等个别公司使用原位合成技术制造芯片外,大多中小型公司普遍采用点样技术制作生物芯片。

 

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