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打印原位合成

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  分子印章技术与打印原位合成在合成原理上相同,区别仅在于该技术利用预先制作的印章将特定的合成试剂以印章印刷的方式分配到支持物的特定区域。后续反应步骤类似与压电打印原位合成技术。分子印章类似于传统的印章,其表面依照阵列合成的要求制作成凹凸不平的平面,依此将不同的核酸或多肽合成试剂按印到芯片片基特定位点进而进行合成反应。选择适当的合成顺序、设计凹凸位点不同的印章即可在支持物上原位合成出位置和序列预定的寡核苷酸或寡肽阵列。从这一点上讲,分子印章原位合成技术与压电打印原位合成技术更为相似。分子印章除了可用于原位合成外还可以点样方式制作微点阵芯片。例如已有人将分子印章技术用于蛋白微点阵芯片的制作。 以上三种原位合成技术所依据的固相合成原理相似,只是在合成前体试剂定位方面采取了不同的解决办法,并由此导致了许多细节上的差异。但,三种方法合成时都必需解决的问题是必需确保不同聚合反应之间的精确定位,这一点对合成高密度寡核苷酸或多肽阵列尤为重要。同时,由于原位合成每步合成产率的局限较长 (>50nt) 的寡核苷酸或寡肽序列很难用这种方法合成。但是,由于原位合成的短核酸探针阵列具有密度高、杂交速度快、效率高等优点,而且杂交效率受错配碱基的影响很明显,所以原位合成的 DNA 微点阵适合于进行突变检测、多态性分析、表达谱检测、杂交测序等需要大量探针和高的杂交严谨性的实验。

 

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