新手必看：有丝分裂基本操作

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有丝分裂是生命科学的基础实验，本文对该实验的原理、要求、所需材料、实验用品、方法、观察、实验小窍门、以及分裂的图片进行展示。另外，生物帮特别策划了近半年来细胞分裂 相关的国内外科研进展盘点，详情请点击：http://www.bio1000.com/reseach/cell/434698.html

实验原理

在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂问期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体或染色质)的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核 内的染色体容易被碱性染料(如龙胆紫、醋酸洋红)溶液着色。

目的要求

1.观察植物 细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。

2.学会制作洋葱根尖有丝分裂装片的生物技术。

3.学会使用高倍镜和绘生物图的方法。

材料

洋葱(可以用蒜、葱代替)。

用具

显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿3个，、剪刀，镊子，滴管。

药品

质量分数为15%的盐酸，酒精的体积分数为95%的溶液，龙胆紫的质量浓度为 0.01 g/mL的或 0.02 g/mL的溶液(或醋酸洋红液)。

方法步骤

一、洋葱根尖的培养

在上实验课之前的3d～4d，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方，注意经常换水，使洋葱的底部总是接触到水。待根长5 cm时，可取生长健壮的根尖制片观察。

二、装片的制作

1.解离 下午2时是洋葱有丝分裂的高峰期，可在此时剪取洋葱的根尖 2 mm～ 3 mm，立即放入盛有氯化氢的质量分数为匕%的溶液和酒精的体积分数为95%溶液的混合液(1：1)的玻璃皿中，在室温下解离3 min～5 min后取出根尖。

2.漂洗 待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min.

3.染色 把洋葱根尖放进盛有龙胆紫的质量浓度为 0.01g/mL或 0.02 g/mL的溶液(或醋酸洋红液)的玻璃皿中，染色3 min～5 min。

4.制片用镊子将这段洋葱根采取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并且用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压盖玻片，这样可以使细胞分散开来。

三、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察

1.低倍镜观察

把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要求找到分生巨细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。

2.高倍镜观察

找到分生区细胞后，把低倍镜移走，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到看清细胞物像为止。

3.仔细观察，可先找出处于细胞分裂期中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细胞。注意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。

4.在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。

5.如果自制装片效果不太理想，可以观察教师演示的洋葱根尖细胞有丝分裂的固定装片。

四、绘图

在观察清楚有丝分裂各个时期的细胞以后，绘出洋葱根尖细胞有丝分裂简图。绘图的要求：绘植物细胞有丝分裂中期图(含4个染色体)。

实验小提示：

⑴为何只截取根尖2—3mm——有利于找到分生区细胞

⑵解离的目的：使组织中的细胞相互分离开。

⑶漂洗的目的：洗去药液，防止解离过度。

⑷用碱性染料染色目的：使染色质和染色体着色，便于观察。

⑸制片的目的：使细胞分散开(成一层细胞)，利于观察。

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