DNA胶回收电泳上样技巧:小孔琼脂糖凝胶比大孔更利于DNA回收
互联网
- 相关专题
- DNA连接与转化
DNA胶回收电泳时通常选择跑大孔的琼脂 糖凝胶。对于大孔的琼脂 糖凝胶,电泳之后的待回收DNA条带通常分布面积较大,弥散且不够清晰,给后续的切胶和回收带来不便。尝试用小孔加样方式对待回收DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳 ,取得了不错的效果。
选择两种不同长度的待回收DNA样品(约800 bp和1700 bp),分别用小孔和大孔琼脂糖凝胶(浓度均为1.5 %)进行电泳。每种待回收的DNA样品体积均为50 μl,对于小孔琼脂糖凝胶电泳,将待回收的DNA样品加样于相邻的5个小加样孔中,每孔加样10 μl;对于大孔琼脂糖凝胶电泳,直接将50 μl待回收的DNA样品加样于大加样孔中。电泳结果如下图所示。
<center> </center>图1 DNA样品胶回收的比较(约800 bp)
(1)小孔琼脂糖凝胶;(2)大孔琼脂糖凝胶。
<center> </center> <center> 1</center> <center> 图2 DNA样品胶回收的比较(约1700 bp)</center>(1)小孔琼脂糖凝胶;(2)大孔琼脂糖凝胶。
图中被白色方框框出的条带即为待回收的DNA。从图中可以看出,与大孔琼脂糖凝胶相比,小孔琼脂糖凝胶中的目的DNA条带更为清晰、锐利,有利于切胶操作及后续的胶收回过程。
上述结果是由实验室人员对比发现的,希望对大家有用,当然也希望大家多多分享下琼脂糖凝胶电泳实验的小技巧 。