性传播性疾病（sexually transmitted diseases,STD）的检测

  （一）梅 毒 螺 旋 体 的 暗 视 野 显 微 镜 检 查
    1．原 理：一 期 梅 毒 硬 下 疳 和 二 期 梅 毒 扁 平 湿 疣 等 皮 肤 粘 膜 损 害 、 肿 大的 梅 毒 性 淋 巴 结 炎 组 织 中 ， 有 梅 毒 螺 旋 体 。 用 病 损 渗出 液和淋巴结穿 刺 液 作 涂 片 ， 在 暗 视 野 显 微 镜 下能 找 到 有 特 征 性形态和运 动 方 式 的 梅毒 螺 旋 体 。
    2．结 果 ：在 暗 视 野 显 微 镜 下 ， 可 见 到 螺 旋 体 呈 纤 细 螺 旋 状 ， 长 度 为 6～16m ，有8～ 14个 螺 旋 ， 运 动 缓 慢 且 有 规 律 ． 其 运 动 方 式 是围绕长轴旋转前后移动，或伸缩圈间距离而运动，或全身弯曲成蛇形。
    3．临床意义：暗 视 野 显 微 镜检查，对一 期 和 二 期 梅 毒的皮肤粘膜损害和淋巴结病变具有快速、简便和可靠的诊断价值，但未查到梅毒螺 旋 体也不难完全除外梅毒。
  （二）梅 毒 的 血 清 学 检 查
    1．原 理：当 人 体 感 染 梅 毒 螺 旋 体 后 ， 经 过 一 定 阶 段 ， 血 清 中 就 可 以 产生 一 定 数 量 的 抗 类 脂 质 抗 原 的 非 特 异 性 反 应 素 和 抗 密 螺 旋 体 抗 原的 特 异 性 免 疫 球 蛋 白 抗 体 ， 主 要 是 IgG和 IgM。 可 以 用 各 种 免 疫学 的 方 法 来 检 测 反 应 素 或 抗 体 ， 作 为 诊 断 梅 毒 的 重 要 手 段 。
    2．方 法：梅 毒 的 血 清 学 检 查 方 法 很 多 ， 但 主 要 可 分 为 非 特 异 性 的 类 脂质 抗 原 试 验 和 特 异 性 密 螺 旋 体 抗 原 试 验 两 大 类 。目 前 较 为 常 用 的 方 法 有 下 列 几 种 ：
    （1）类 脂 质 抗 原 类 试 验
    ①性 病 研 究 实 验 室 试 验 （venereal disease research laboratory，VDRL）。
    ②不 加 热 血 清 反 应 素 试 验 （unheated serum reaction，USR）。
③快 速 血 浆 反 正 素 环 状 卡 片 试 验 （rapid plasma reagin circle card test,RPR）。
    （2）密 螺 旋 体 抗 原 类 试 验
    ①荧 光 密 螺 旋 体 抗 体 吸 收 试 验 （fluorescent troponemal antibody-absorption test,FTA-ABS ）：荧 光 密螺 旋 体 抗 体 吸 收 试 验在 国 外 被 认 为 是 权 威 性 的 方 法 。 除 TPHA试 验 外 ， 几 乎 代 替 了 所有 以 螺 旋 体 为 抗 原 的 试 验 方 法 。
    ②梅 毒 螺 旋 体 血 球 凝 集 试 验 （troponema pallidum hemagglutination test,TPHA）：是 以 梅 毒 螺 旋 体 为 抗原 的 间 接 血 球 凝 集 试 验 ， 是 一 种 操 作 比 较 简 单 的 特 异 性 证 实 试验 。结 果 明 显 ， 容 易 判断 。经 临床 使 用 证 明 其 敏 感 性 和 特 异性 都 比 较 高 ， 操 作 也 很 方 便 ， 但 对 一期梅 毒 的 阳 性 率 不 如 FTA－ABS试 验 敏 感 。
  （三） 临 床 意 义
        非 特 异 性 的 类 脂 质 抗 原 类 试 验 ， 由 于 设 备 简 单 ， 操 作 方 便 ，报 告 快 速 ， 易 于 推 广 ， 且 有 一 定 的 敏 感 性 和 特 异 性 ， 常 被 用 作 筛选 试 验 ， 特 别 适 用 于 大 量 标 本 的 检 查 。 而 且 它 可 以 随 着 治 疗 后 病情 的 变 化 ， 滴 度 下 降 或 转 阴 性 ； 因 此 ， 可 以 作 为 疗 效 观 察 或 随 访有 否 复 发 或 再 感 染 的 指 征 。
特 异 性 的 密 螺 旋 体 抗 原 类 试 验 ， 需要 一 定 的 设 备 条 件 ， 操 作较 为 复 杂 ， 试 剂 精 确 度 要 求 较 高 。 它 既 有 较 高 的 敏 感 性 ， 又 有 很高 的 特 异 性 ， 常 被 作 为 梅 毒 诊 断 的 证 实 试 验 。 但 是 由 于 95％以 上的 病 人 ， 一 旦 试 验 呈 阳 性 反 应 后 ， 即 使 经 过 治 疗 ， 也 终 身 不 会 转 为阴 性 。 因 此 不 能 作 为 疗 效 观 察 和 随 访 的 指 征 。

  （一）分 泌 物 的 涂 片 检 查
    1．原 理 ：急 性 淋 菌 性 尿 道 炎 及淋 菌 性宫颈炎病 人 有 大 量 黄 白 色脓 性 分 泌 物 。 在脓细胞 内 有 许 多淋 球 菌。 淋 球 菌 革 兰 染 色 呈 阴 性 反 应 （ 红 色 ） 。因 此 ， 取 病 人 尿 道 或阴道分 泌 制 成涂片 后革兰氏染色 ， 检 查 有 无 淋 球菌 ， 可 作 为 初 步 诊 断 的 依 据 。    
    2．临 床 意 义 ：涂 片 检 查 方 法 简 便 、 有 效 、 价 格 低 廉 且 有 一 定 的 特 异 性 。 但其 特 异 性 随 着 取 材 部 位 的 不 同 而 有 所 不 同 。从 女 性 宫 颈 取 材 特 异 性 低 ， 因 女 性 宫 颈 分 泌 物 中杂菌 很 多 ， 有 的 在 形 态 上 很 象 淋 球 菌 。 因 此 ， 世 界 卫 生 组 织 不 推荐 用 革 兰 染 色 涂 片 检 查 女 性 病 人 。 这 种 方 法 敏 感 性 差 ，有 不 少 病 人 会 被 漏 诊 。
  （二）淋 球 菌 的 分 离 培 养
    1．原 理：
各 种 细 菌 在 培 养 基 上 生 长 的 菌 落 形 态 各 不 相 同 ， 根 据 所 生 长的 菌 落 的 大 小 、 表 面 高 起 或 扁 平 、 光 泽 、 颜 色 和 边 缘 的 情 况 等 ，可 作 为 细 菌 鉴 定 的 标 准 。
       目前常用的有四种培养基，分别为改良Thayer-Martin含有制霉菌素、Martin-Lewis含有茴香霉素、New York City琼脂含二性霉素B和James培养基。
    2．结 果：淋 球 菌 在 血 平 板 上 经 24～ 48小 时 的 培 养 之 后 ， 可 形 成圆 形 、凸 起 、 湿 润 、 光 滑 、 半 透 明 或 灰 白 色 的 菌 落 ， 边 缘 呈 花 瓣 状 ， 直径 为 0.5～ 1.0mm， 用 白 金 耳 触 之 有 粘 性。
    3．临 床 意 义 ：淋 球 菌 的 培 养 主 要 用于 作 进 一 步 诊 断  和淋 球菌做 药 物 敏 感 性试 验 等 用途 。淋 球 菌 的 培 养 是 目 前 世 界 卫 生 组织推荐的筛查 淋病 病 人 的 唯 一 方 法 。

  （一）沙眼衣原体的培养
    1．原理：沙眼衣原体是细胞内寄生物，仅能在组织细胞中生长，McCoy细胞提供了衣原体生长繁殖的条件，因此常用来进行培养和检查，是目前衣原体检查中较好的方法，但此方法复杂、费用很高，一般单位不能开展。
    2．临 床 意 义：衣 原 体 分 离培 养 阳 性伴 有尿 道 炎症状者 是 非 淋菌性 尿 道 炎 的 指 征 。 有 尿 道 炎 症 状而衣原体培 养阴性应注意支原体的感染。
  （二）检查衣原体的试剂盒
      目 前 有 两 种 商 品 性 试 剂 盒
    1．Chlamydiazyme试 验 ：此 诊 断试剂 盒的敏 感 性 为 81％， 特 异 性为98% 。
    2．Micro Trak试验：此 法 是用 荧 光 素 标 记 的 单 克 隆 抗体 鉴 定 衣 原 体 。
  （三）细 胞 学 检 查 法
      用 姬 姆 萨 、碘染色 和 免 疫荧光染色可 在 分 泌 物中见到衣 原 体 的 包 涵 体 。
  （四）血清学诊断
      目 前 尚 无 理想的 诊 断 生 殖 造 沙 眼衣原体感 染 的 血 清 学 方 法 ，此种方法的 敏 感 性 和特 异 性 都 不 高 。

  （一）直接镜检法
      因支 原 体 形 态 、 大 小 难 与 组 织 细 胞或渗出液中的其它颗粒相鉴别，因此，此方法意 义 不 大。
  （二）分离培 养法
    1．原 理：一 般 把 标 本 直 接 分 离 在 支 原 体 鉴 别 培 养 基 和 增 菌 培 养于 一 组含 有 指 示 剂（酚 红 ） 和 尿 素 或 精 氨 酸 或 葡 萄 糖 的 肉 汤 培 养 基 中 ，视其 分 解 反 应 。当 支 原 体 在某种培 养 基 中 生 长 并 分 解 尿 素 或精氨 酸 或 葡 萄 糖 时 可 使 培 养 基酸碱 度 改 变 ， 而 使 酚 红 指 示 剂 变 色时 ， 就 应 将 标 本 传 代 到 新 鲜 的肉汤培 养 基 和 琼 脂 鉴 别 培 养 基， 以 获 得 纯 培 养 。
    2．意义：解脲 支 原 体 有 尿 素 酶 ，可 将尿素分 解 产 氨 ， 使 培 养 基 呈 碱 性 ， 颜 色 由 黄 色 变 为 粉 红 色 。 人 型 支 原体 能 分 解 精 氨 酸 产 氨 ， 使 含 精 氨 酸 肉 汤 培 养 基 呈 碱 性 的 粉 红 色 。而 发 酵 糖 类 的 支 原 体 可 发 酵 葡 萄 糖 产 酸 ， 使 培 养 基 由 粉 红 变 为黄色。分 离 培 养 是 支 原 体 实 验 室 诊 断 的 唯 一 方 法 。
  （三）血清学检查
血清学包括间接血凝法、ELISA测定和免疫沉淀法等，均可测出血清中低滴度的血清支原体抗体。由于人群中普遍存在支原体，因此，此方法常规实验室检查意义不大。