神经兴奋不应期的测定

[实验目的]
　　熟悉测定神经干动作电位不应期的方法
　　理解可兴奋组织在兴奋过程中其兴奋性的规律性变化。
[实验原理]
　　可兴奋组织受到刺激产生兴奋后，其兴奋性会发生一系列有规律性的变化，依次经过绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后恢复到正常的兴奋性水平。为了测定神经兴奋后兴奋性的变化，采用双脉冲刺激，可预先给神经施加一个最大（条件性）刺激，引起神经兴奋，然后按不同时间间隔给予第二个（检验性）刺激，检查神经对检验性刺激是否反应和所引起的动作电位幅度的变化，来判定神经组织兴奋后的兴奋性的变化。以两个刺激间隔测出神经干的不应期(图5.6-1)。

　　当第二个刺激引起的动作电位幅度开始降低时（设为t2），说明第二个刺激开始落入第一次兴奋的相对不应期内。当第二个动作电位开始完全消失，表明此时第二个刺激开始落入第一次兴奋后的绝对不应期内（设为t1），那么t2-t1即为相对不应期。
[实验对象]
　　蟾蜍或蛙。
[实验药品]
　　见实验5.5
[ 仪器 器械]
　　见实验5.5
[实验方法与步骤]
　　1.坐骨神经标本的制备见实验5.5
　　2. 仪器 及标本的连结
　　（1）若使用刺激器、示波器进行实验，参照图5.5-1连接仪器。且将一对引导电极连至示波器Y轴上线，用以观察单相动作电位(用镊子将两个记录电极之间的神经夹伤)。从电子刺激器输出端连一条引线至示波器下线，以观察刺激方波的大小和位置。调节强度旋钮，利用单个刺激找出最大刺激强度值。以此刺激强度输出双脉冲刺激波。调节“延迟”旋钮，使双脉冲之间的时间间隔为20 ms，此时荧光屏上将出现两个同样大小的动作电位。
　　（2）若使用计算机 生物 信号采集处理系统进行实验则参照图5.5-2连接仪器。
　　3.按实验5.5找出最大刺激强度。
　　4.维持最大的刺激强度，（调节延迟）缩短两个刺激方波之间的时间间隔，使第二个动作电位向第一个动作电位靠近，动作电位幅度开始降低乃至完全消失。记下从刺激伪迹到第一个矩形方波间隔和从刺激伪迹到第二个矩形方波间隔，
[注意事项]
　　
　　2.用刚刚能使神经干产生最大动作电位的刺激强度刺激神经。
　　3.增加观察次数，以减少读数的误差。
[实验结果]
　　1.将观察到的结果打印或描画于实验报告上（图5.6-1），并标出神经干动作电位的不应期。
　　2.计算出神经干动作电位的绝对不应期和相对不应期。