唾液分泌的观察

[实验目的]
　　 观察唾液腺的分泌以及外界刺激对唾液分泌的影响。
　　了解瘘管术在消化吸收生理研究上的应用。
[实验原理]
　　狗和猪的腮腺仅在食物进入口腔或有条件刺激存在时分泌唾液。不同刺激因素所引起的生物学意义不同，使腮腺分泌的唾液的量与质也有差异。通过手术给狗或猪安装腮腺瘘管，可以观察到不同刺激因素对唾液分泌的影响。
[实验动物]
　　狗或猪或羊。
[实验药品]
　　3%戊巴比妥钠、0.2% HCl溶液
[ 仪器 与器械]
　　手术器械一套、探针、唾液 漏斗 、唾液采集管(带刻度)、门杰雷耶夫氏胶、石蕊试纸、棉花、食饵刺激物(干馒头粉、肉、水、青菜、甘薯、麦麸、米糠)；嫌恶性食物(小石子、砂)。
[实验方法及步骤]
　　1.实验的准备
　　静脉注射戊巴比妥钠(30～50 mg·kg ^-1 )将狗麻醉后，侧卧固定于手术台上，剃去颊部的被毛并消毒。左手拉起上唇口角部分，将其外翻，寻找腮腺导管的排出口。腮腺导管排出口位于颊部粘膜与第Ⅱ或Ⅲ上臼齿相对的小粘膜结节上，导管口径似针尖大小。将探针插入排出口内3～5 cm左右，以免手术时伤及腺导管。在管口周围粘膜上用手术刀划一直径约lO mm的圆圈， 稍稍剥离粘膜下结缔组织，用细针在粘膜圆圈的边缘穿四条丝线，然后用手术刀由内向外刺穿颊部，用外科镊子夹住露在外面的手术刀尖，在拔出手术刀时，使镊子随刀通过伤口进入口腔内，将探针抽出，再用此镊子夹住腺管排泄口周围粘膜上的丝线，连同粘膜圆块一起抽出来，注意切勿使腺管捻转。用手术刀（或外科剪）去除一小块皮肤。然后将抽出的粘膜圆块缝于颊部皮肤上，口腔内的创口作连续缝合，将拽在外面的粘膜涂一层凡士林，并用数层纱布覆盖，纱布用门杰雷耶夫氏胶粘在皮肤上。手术后2～3天去掉纱布，术后7～9天拆线，就可开始实验(图9.2-1)。
　　猪的腮腺瘘管手术，由于解剖特点而略有改变,手术部位从口角上方7～l0 cm处开始，在与齿龈平行的部位切开皮肤3～5 cm。分离结缔组织到达颊部粘膜背面。然后从口腔内找出腮腺导管开口，在皮肤创口前角部位，接近齿龈处切开粘膜，将连有粘膜块的腮腺导管翻出，在皮肤创口处的固定术与狗的相同。羊的腮腺瘘管术后述※。
　　2.实验项目
实验开始时狗站立在固定架上，先将唾液 漏斗 固定于颊部，用以收集唾液，然后逐项进行实验，主要观察内容有:唾液分泌的潜伏期、分泌持续的时间及分泌量。
　　（1） 给狗看干馒头粉1 min 。
　　（2） 喂干馒头粉40 g。
　　（3） 向口中注射自来水5 ml。
　　（4） 向口中注射稀HCl 5 ml。
　　（5） 给狗看肉粉l min。
　　（6） 喂肉粉40 g。
　　（7） 向口中放小石子数块。
　　（8） 向口中放少量细砂。
　　以猪为实验动物的实验方法与狗相同。可投喂下列饲料各50 g:青菜、麦麸、甘薯、米糠。
[注意事项]
　　1.实验时用浸润乙醚的棉球把瘘管周围皮肤揩干净(毛长了要剪毛或剃毛)，然后用干棉球按住，把门杰雷耶夫氏胶加热涂在唾液漏斗周围，乘热粘在瘘管处。粘唾液漏斗时，瘘管周围要保持干燥，否则会漏气。
　　2.每项实验内容结束后应间隔3～5 min，再进行下一个实验项目。
[实验结果]
　　将上述实验结果列表统计,并加以分析讨论。
[思考题]
　　1.影响唾液分泌的因素有哪些，简要说明其作用机理。
　　2.给狗看馒头与喂干馒头粉时唾液分泌有何变化？它们的作用机制是否相同？
[附]
　　1.注:门杰雷耶夫氏胶的配制:松香4份(研碎)，氯化铁1.6份，蜂蜡1份，亚麻仁油少量。先将氧化铁和蜂蜡加热溶解后加入松香拌匀，最后加入少许亚麻仁油(3000 g加10ml)即成。
　　※2.该实验也可用羊做实验对象，羊的腮腺漏管术如下：
　　动物侧卧，固定，剃去頰部的毛，用0.3%普鲁卡局部麻醉；由咬肌前端向内眼角方向切开皮肤2～3 cm，分开创口，在颜面静脉后方找到腮腺管，仔细分离，注意切勿伤及腮腺神经。在腮腺管下穿三根线，纵行切开腮腺管，分别与切口的两端插入准备好的塑料细管（将塑料细管上另带一备用线）。用腮线管两边已备的线分别将两塑料细管结扎固定，然后再用中间的已备的线将两塑料管及腮腺管结扎在一起。为了更好地固定，防止脱落，可将塑料细管上早已备的线与腮腺管上的结扎线再次结扎在一起。两条塑料细管外端再套上一塑料或橡胶管，形成体外吻合。此时唾液从近腺体的细管流出，经吻合管流进远端导管，流入口腔（图9.2-2）。