正交试验法在微生物培养条件优化选择中的应用

一．目的要求
对于一个 生物 作用过程，其结果或产物的得到受到多种因素的影响。如发酵中，菌种的 生物 活性、酶的浓度、底物浓度、温度、pH 值、菌种生长环境中的氧气、二氧化碳浓度、各种营养成分的比例等。对于这种多因素的实验，如何合理地设计实验，提高效率，以达到所预期的目的是需要进行认真考虑和周密准备的。
本实验运用正交实验法测定酵母用量、葡萄糖浓度、温度、磷酸盐用量这四个因素在不同水平对发酵过程和结果的影响，并应用生物统计学的计算方法分析处理实验数据，求得什么样的酵母用量、葡萄糖浓度、温度、磷酸盐用量对发酵效果最好，并确定影响实验的关键因素及最适条件。
二．基本原理
正交实验法是安排多因素、多水平的一种实验方法，即借助正交表的表格来计划安排实验，并正确地分析结果，找到实验的最佳条件，分清因素和水平的主次，这就能通过比较少的实验次数达到好的实验效果。实践证明，正交法是一种行之有效的好方法，被广泛地运用于工农业生产和科学研究实验。 ’
三．正交实验法的基本步骤
1）．明确试验目的，确定评价指标
评价指标有时只有一个，有时可能有多个。当评价指标多于两个，为多指标试验。
2）．挑选因素
影响试验指标的因素很多，由于试验条件的限制，不可能逐一或全面地加以研究，因此要根据已有的专业知识及有关文献资料和实际情况，固定一些因素于最佳水平，排除一些次要的因素，而挑选一些主要因素。正交试验设计法正是安排多因素试验的有利工具。当因素较多时，除非事先根据专业知识或经验等，能肯定某因素作用很小而不选取外，对于凡是可能起作用或情况不明或看法不一的因素，都应当选入进行考察。
3）．确定各因素的水平
因素的水平分为定性与定量两种，水平的确定包含两个含义，即水平个数的确定和各个水平数量的确定。 对定性因素，要根据试验具体内容，赋予该因素每个水平以具体含义。定量因素的量大多是连续变化的，这就要求试验者根据相关知识或经验、或者文献资料首先确定该因素的数量变化范围，而后根据试验的目的及性质，并结合正交表的选用来确定因素的水平数和各水平的取值。每个因素的水平数可以相等，也可以不等，重要因素或特别希望详细了解的因素，其水平可多一些，其他因素的水平可以少一些。如果没有特别重要的因素需要详细考察的话，要尽可能使因素的水平数相等，以便减小试验数据处理工作量。
4）．制定因素水平表
根据上面选取的因素及因素的水平的取值，制定一张反映试验所要考察研究的因素及各因素的水平的“因素水平综合表’’。该表在制定过程中，对于每个因素用哪个水平号码，对应于哪个量可以随机地任意确定。一般讲最好是打乱次序安排，但一经选定之后，试验过程中就不能再变了。
5）．选择合适的正交表
常用的正交表较多，有几十个，可以灵活选择。应注意的是，选择正交表与选择因素及其水平是相互影响的，必须综合考虑，而不能将任何一个问题孤立出来。选择正交表时一般需考虑以下两个方面的情况：
①所考察因素及其水平的多少。选用的正交表，要能容纳所研究的因素数和因素的水平数，在这一前提下，应选择试验次数最小的正交表。
②考虑各因素之间的交互作用。一般说来，两因素的交互作用通常都有可能存在，而三因素的交互作用在通常情况下可以忽略不计。
6）．确定试验方案
根据制定的因素水平表和选定的正交表来安排试验时，一般原则如下：
①如果各因素之间无交互作用，按照因素水平表中固定下来的因素次序，顺序地放到正交表的纵列上，每一列放一种因素。
②如果不能排除因素之间的交互作用，则应避免将因素的主效应安排在正交表的交互效应列内，以妨碍对因素主效应的判断。
③把各因素的水平按照因素水平表中所确定的关系，对号入座后，试验方案随即确定。
7）．正交试验结果的分析
正交试验结果的直观分析与正交试验结果的方差分析相比，具有计算量小、计算简单、分析速度快、一目了然等特点，但分析结果的精确性与严密性相对于方差分析来说稍差。直观分析主要可以解决以下两个问题：
①求最佳水平组合。该问题归结为找到各因素分别取何水平时，所得到的试验结果会最好。