免疫微粒技术
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免疫微粒技术是利用高分子材料合成一定粒度大小的固相微粒作为载体,包被上具有特异性亲和力的各种免疫活性物质(抗原或抗体),使其致敏为免疫微粒,用于免疫学及其他
生物
学检测与分离的一项技术。作为载体的微粒通常是以某种高分子有机单体为原料,经过乳液聚合、悬浮聚合及辐照聚合等高分子聚合方法制备而成。由于制备材料及工艺不同,微粒的种类繁多,现已制成惰性微粒如聚苯乙烯胶乳微粒、活性微粒如羧化聚苯乙烯微粒、磁性微粒及标记微粒(用同位素、荧光素或酶标记)等四大类微粒,数量多达几十种。将制备好的微粒与抗原(或抗体)经物理吸附、化学偶联及
生物
素亲合亲桥联法等致敏方法形成免疫微粒。广泛应用于各种可溶性大分子物质的检测、分离与纯化、细胞标记与识别等。近年来,微粒技术在核酸分子杂交、DNA与RNA的分离及PCR等研究领域亦显示出广阔的应用前景。
1. 胶乳微粒免疫检测技术
胶乳微粒免疫检测技术是在胶乳凝集定性试验基础上发展建立的-种非放射性均相免疫测定法,可以对各种微量的抗原物质和小分子半抗原(加药物、团体 激素 等)进行精确的定量测定。根据特异性 抗体 致敏的胶乳微粒(一般为直径约1μm的聚苯乙烯胶乳),与待测标本中的相应抗原相遇时发生凝集反应,胶乳凝集程度与被测物的浓度呈函数关系,由此可测出标本中待测物的含量。测定方法主要有粒子计数法和浊度法两种。
2. 免疫磁性微粒分离与纯化技术
磁性微粒(magnetic microspheres, MMS) 是80年代初,用高分子材料和金属离子为原料,聚合而成的一种以金属离子为核心,外层均匀地包裹高分子聚合体的固相微粒。在液相中,受外加磁场的吸引作用,MMS可快速沉降而自行分离,无需进行离心沉淀。因此,将MMS应用于免疫检测,可使操作过程大为简化。经过特异性 抗体 包被制成免疫MMS,与检样中的抗原结合形成免疫MMS-靶分子(或靶细胞)复合体,通过外加磁场的作用即可与其他成分分离开来。再以适当方式使复合体解离,在磁场吸引下除去游离的免疫MMS,即可获得纯化的靶分子或细胞。
1. 胶乳微粒免疫检测技术
胶乳微粒免疫检测技术是在胶乳凝集定性试验基础上发展建立的-种非放射性均相免疫测定法,可以对各种微量的抗原物质和小分子半抗原(加药物、团体 激素 等)进行精确的定量测定。根据特异性 抗体 致敏的胶乳微粒(一般为直径约1μm的聚苯乙烯胶乳),与待测标本中的相应抗原相遇时发生凝集反应,胶乳凝集程度与被测物的浓度呈函数关系,由此可测出标本中待测物的含量。测定方法主要有粒子计数法和浊度法两种。
2. 免疫磁性微粒分离与纯化技术
磁性微粒(magnetic microspheres, MMS) 是80年代初,用高分子材料和金属离子为原料,聚合而成的一种以金属离子为核心,外层均匀地包裹高分子聚合体的固相微粒。在液相中,受外加磁场的吸引作用,MMS可快速沉降而自行分离,无需进行离心沉淀。因此,将MMS应用于免疫检测,可使操作过程大为简化。经过特异性 抗体 包被制成免疫MMS,与检样中的抗原结合形成免疫MMS-靶分子(或靶细胞)复合体,通过外加磁场的作用即可与其他成分分离开来。再以适当方式使复合体解离,在磁场吸引下除去游离的免疫MMS,即可获得纯化的靶分子或细胞。