显微镜的构造与使用方法
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1.了解光学显微镜的构造、成像原理及其使用方法。
2.学习临时装片及绘制生物图的方法。
[材料用品]
材料:水绵营养体
用品:显微镜、载玻片、盖玻片、小烧杯、滴管、尖咀镊子、滤纸条、。
[方法与步骤]
一、 光学显微镜的结构
基本结构可分为两个部分:
(一)显微镜的光学部分
1.目镜:由二、三片透镜组成,安装在镜筒上端,也叫接目镜。在目镜上方刻有5×、10×、20×等为放大倍数。从外表上看,镜头越长放大倍数越低。
2.物镜:由数组透镜组成,安装在转换器上,又称接物镜,每台显微镜上常备有几个不同倍数的物镜,物镜上所刻8×、10×、40×等就是放大倍数,习惯上把10-20倍的叫做低倍物镜;40-60倍的叫做高倍物镜;90-100倍的叫做油镜。从形态上看,接物镜越长,放大倍数越高。
显微镜的放大倍数,粗略计算方法为接目镜放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。如观察时所用接物镜为40×、接目镜为10×,则物体放大倍数为40×10=400倍。
3.集光器:位于载物台下方。由二、三块透镜组成,其作用是聚集来自反光镜的光线,使光度增强,并提高显微镜的鉴别力,集光器下面装有光圈(可变光阑),由十几张金属薄片组成,可以调节进入集光器光量的多少。若光线过强,则将光圈孔口缩小,反之则张大,集光器还可以上下移动,以调节适宜的光度。
4.反光镜:具两面,一面为平面镜,一面为凹面镜。其用途是收集光线。平面镜使光线分布较均匀。凹面镜有聚光作用,反射的光线较强,一般在光线较弱时使用。(有些显微镜可自带光源,因而没有反光镜)
(二)机械部分
1.镜座:在显微镜的底部,用于支持整个显微镜。
2.镜柱、镜臂和倾斜关节:镜座上的直立短柱叫做镜柱。镜柱上方的弯曲的弓形部分叫做镜臂,是握镜的地方。镜臂和镜柱之间有一个能活动的倾斜关节,可使显微镜向后倾斜,便于观察。
3.载物台:镜臂下端安装的一个向前伸出的平面台叫做载物台。用于放置观察用的玻片标本,载物台中央有一圆孔,叫通光孔。通光孔左右两旁一般装有一对弹簧夹,为固实玻片之用,有的装有移片器,可使玻片前后左右移动。
4.镜筒:安装在镜臂上端的圆筒叫做镜筒,上端安装目镜,下端连接转换器。
5.物镜转换器:镜筒下端的一个能转动的圆盘叫做转换器。其上可以安装几个接物镜,观察时便于调换不同倍数的镜头。
6.准焦螺旋:镜臂上装有两种可以转动的螺旋,能使镜筒上升或下降,称为准焦螺旋。大的螺旋转动一圈。镜筒升降10毫米,用于调节低倍镜,叫做粗准焦螺旋。小的螺旋围动一圈,镜筒升降0.1毫米。主要用于调节高倍镜,叫做细准焦螺旋。
二、光学显微镜的成像原理
光学显微镜是利用光学的成像原理观察植物体结构,显微镜的成像原理如图所示(挂图)。
三、光学显微镜的使用
1.镜检环境
室内一般应该宽阔而清洁,地基坚固没有震动,潮气和尘埃很少,不应放置腐蚀性的
试剂
。利用自然光做光源时,不宜用直射的太阳光,以免对观察者的眼睛造成伤害。一般利用阳光的散射光,特别是天空或白云的反射光线。
2.显微镜的放置
将显微镜放置在实验台桌面上,距实验台边缘约5cm。略偏于操作者左方,右侧放绘图纸等实验用具。
3.采光
扭转转换器,使低倍镜正对通光也,打开聚光器上的光圈,然后左眼对准接目镜注视,右眼睁开,用手翻转反光镜,对向光源,光强时用平面镜,光较弱时用凹面镜。这时从目镜中可以看到一个明亮的圆形视野,只要视野中光亮程度适中,光就对好了。
4.装置玻片标本
将要观察的玻片标本,放在载物台上,用弹簧夹或移光器将玻片固定。将玻片中的标本对准通光孔的中心。
5.低倍镜的使用
将低倍镜旋转到中央,小心的将粗准焦螺旋向下转动到离玻片约1cm左右。之后,再用粗准焦螺旋把低倍镜放下到离玻片2-3mm处,通过接目镜观察标本,同时按反时针方向用粗准焦螺旋使镜筒缓缓地上升,缓缓移动玻片,直到看到物象为止,这时,进一步用细准焦螺旋上下转动,使物象达到最清晰的程度。
6.高倍镜的使用
首先如上程序于低倍镜下找到材料,然后再把需要用高倍镜观察的部分移到视野中央,用弹簧夹压紧,不再移动。换上高倍镜,用细准焦螺旋上下转动,到出现清晰的物象为止。
7.油镜的使用
(1)先用低倍镜找到要观察的物体,再换至高倍镜,将物体置于视野中央,并使集光器所收集的光亮达到最大。
(2)将镜筒上旋,将香柏油加一小滴于集光器与盖玻片上。
(3)将镜头缓缓放下,使油镜浸入油滴,靠近观察物体,然后边观察边用细准焦螺旋,由下向上调节,找到要观察的物体。
(4)观察完毕后,将镜头旋离玻片,用檫镜纸檫去镜头上的香柏油。
四、临时装片
将要观察的材料放在载玻片的水滴中,加盖盖玻片,以备显微镜下观察,这种方法叫做临时装片,临时装片的优点在于,新鲜材料组织不会破坏,可保持原来生活状态,同时操作简便,不受设备条件限制,随时随地可以进行。
制作临时装片时首先将载玻片,盖玻片擦拭干净,拭擦玻片动作要轻,手指用力要均匀,否则易拭破。在载玻片中央,滴加一、二滴清水。然后用镊子放水绵少许,放在载玻片上,再将盖玻片轻轻盖上,注意:为了不使其内有气泡,必须将盖玻片先从一侧放下,使接触到水,然后慢慢放下,如仍有气泡,可用镊子轻轻加压盖玻片,或者解剖针对盖玻片稍为提高,然后再放下,水不能过多,水量过多,则盖玻片易浮动,这时可用小滤纸条将水分吸干,如水分过少,水没有填满盖玻片,可以侧面用滴管加水少许。总之,应使盖玻片紧贴载玻片,不能浮动,这样才利用观察。
最后拭干玻片四周的水分,置显微镜下观察。
临时装片技术,是本课程实验课最常用的基本技术,要求每个同学反复练习,熟练掌握。
五、
生物
绘图法
生物
实验图不同于一般美术图,也不同于机械制图。生物绘图要求将标本的外形和内部结构准确的措施下来,然后详加说明,要求形象自然,比例适当,线条清晰。
生物绘图一般用点、线表示,轮廓用线条描绘,明暗程度、物质含量多少等则用细点的蔬密表示之,图纸应选择能够用橡皮拭擦的上好白纸,绘图时先用中软铅笔绘出轮廓,然后用较硬的铅笔绘出全图,图中各部分应注字说明,图与字之间用水平细线连系之,图的标题填在图的下方。
很多细小生物体或解剖结构是通过显微镜观察认识的。因此要逐步训练用左眼观察,右眼看图纸。将观察结果准确地描绘出来。