免疫金标记技术
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免疫金标记技术
胶体金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶液,具有高电子密度,并能与多种生物大分子结合,已成为继荧光素、放射性核素和酶之后,在免疫标记技术中较常用的一种非放射性示踪剂。1971年,Faulk和taylor首先报道将胶体金与抗体结合,应用于电镜水平的免疫细胞化学研究,随着技术的不断改进和完善,免疫金标记术已建立了免疫转印、流式细胞术、液相免疫测定、固相斑点金/银染色(dot IGS/IGSS)及斑点免疫渗滤测定(dot immunogold filtration assay,DIGFA)等多种标记免疫检测方法,成为目前免疫组织化学技术中较常用的敏感方法之一。
基本原理:免疫金标记技术(immunogold labelling technique)是以胶体金作为示踪物,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。胶体金是由氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠和鞣酸等作用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,故称胶体金。利用它在碱性条件下带负电荷的性质,与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外,胶体金还可与其它多种生物大分子,如SPA、PHA、ConA等结合。