丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

致病基因的条件性敲入,构律人类某些疾病的动物模型

互联网

1719
致病基因的条件性敲入,构律人类某些疾病的动物模型
 
    利用Cre/loxP系统进行条件性基因 敲人的原理与基因敲除的原理非常相似,区别只是在事先想要研究的基因编码区内引入一段翻译终止序列,并且该终止序列的两侧具有两个同向的loxP位点。在没有Cre重组酶的组织和器官中,由于翻译终止序列存在致病基因是没有活性的,在某些特定的组织器官中,当Cre重组酶出现时会导致终止序列的丢失,从而使致病基因激活,这样就实现了致病基因在某些特定组织和器官中的条件性敲人。
 
    AML―ETO是一个融合蛋白,在急性粒细胞白血病的发生中具有重要意义,但是采用普通的转基因手段使小鼠表达该基因后会严重影响正常的造血功能,因此会导致小鼠胚胎发生宫内死亡。Masakazu等采用条件性基因敲人方法研究了该基因在急性粒细胞白血病的发生中所发挥的作用,克服了上面所提到的问题,取得了比较理想的结果。他们首先用两个loxP位点之间的转录终止序列分割AML―ETO的编码基因,从而使该基因在没有Cre的情况下处于非活化状态。该转基因小鼠与Mxl―Cre转基因鼠进行交配产生的子代小鼠同时含有这两种外源基因。在Mxl―Cre转基因小鼠中Cre的产生受Mxl的启动子调控,而Mxl启动于在聚肌苷酸―聚胞苷酸(polyinocinic―polycytidylicacid,pI―pC)存在的情况下处于活化状态,因此,通过pI―pC就可以调节AML―ETO基因的活化与否。这样,在小鼠胚胎发育过程中就可以避免由于AML―ETO基因的引入而引起的死亡,等小鼠出生后在其生长的不同时期向腹腔内注射pI―pC就可以活化AML―ETO基因,可进一步研究该基因与白血病发生之间的关系。通过该研究发现单独的AML-ETO基因并不能导致粒细胞白血病的发生,它还需要有与该基因协同的其他突变存在才能引发白血病。
提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序