显微鉴定的内容
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组织鉴定是通过观察植(动)物器官的各种切片,以生药的组织构造 、细胞 形状和内含物形态等特征来鉴定生药的真伪。用于完整药材或能够满足制作切片条件的饮片的鉴定。组织鉴定适于药材性状特征难区别或外形相似而组织构造不同的类似品、混淆品、代用品、伪品,或用于同属多来源药材的对比鉴别。一般来说,组织鉴定对不同科属来源的药材鉴别比较容易,对于相同科属来源的药材鉴别相对较困难。
(二)粉末鉴定 (powder identification)
粉末鉴定是通过生药的粉末制片,观察生药的细胞 、内含物形态特征来鉴定生药的真伪。通常用于粉末药材、外形较大或组织构造无鉴别特征的药材、破碎药材以及粉末性的中成药的鉴别。
(三)显微化学反应 (micro-chemcal reaction)
显微化学反应是将生药的干粉、手切片或浸出液少量,置于载玻片上,滴加某些化学试剂使产生沉淀或结晶,或产生特殊的颜色,在显微镜下观察反应结果,从而进行鉴定。显微化学反应主要用于细胞 壁、糖类、蛋白质、草酸盐、碳酸盐和各类化学成分的鉴别。
1 .细胞 壁性质的鉴定
木质化细胞 壁加间苯三酚试液 1~2 滴,稍放置,加盐酸 l 滴,因木化程度不同,显红色或紫红色。木栓化或角质化细胞 壁遇苏丹 Ⅲ 试液,稍放置或微热,呈橘红色至红色。纤维素细胞 壁遇氯化锌碘试液,或先加碘试液湿润后,再加硫酸溶液显蓝色或紫色。硅质化细胞 壁遇硫酸无变化。
2. 细胞 内含物性质的鉴定
淀粉粒遇碘试液显蓝色或蓝紫色。糊粉粒,加碘试液,显棕色或黄棕色;加硝酸汞试液显砖红色。脂肪油、挥发油或树脂,加苏丹 Ⅲ 试液呈橘红色、红色或紫红色;加 90 %乙醇,脂肪油一般不溶解,挥发油则溶解。菊糖加 10 % α- 萘酚的乙醇溶液,再加硫酸,显紫红色并很快溶解。粘液细胞 遇钌红试液显红色。草酸钙结晶在装片时加入硫酸溶液逐渐溶解,并析出针状硫酸钙结晶。碳酸钙结晶(钟乳体)加入稀盐酸溶解,同时有气泡产生。硅质加硫酸不溶解。
3. 细胞 内化学成分的鉴定
根据生药中所含有的化学成分,选择合适的化学试剂,可以达到鉴别的目的。如黄连粉末滴加稀盐酸,可见针簇状小檗碱盐酸结晶析出;肉桂粉末加氯仿 2~3 滴,略浸渍,速加 2% 盐酸苯肼 1 滴,可见黄色针状或杆状结晶(示桂皮醛反应);槟榔粉末酸性水浸液滴于玻片上,加碘化铋钾试液,即发生浑浊,放置后可见石榴红色球形或方形结晶(示槟榔碱反应);番木鳖胚乳薄片置白磁板上,加 1% 钒酸铵的硫酸溶液 1 滴,迅速显紫色(示番木鳖碱),如加发烟硝酸 1 滴,显橙红色(示马钱子碱)。
利用显微化学定位试验,可以确定生药有效成分在生药组织构造中的部位,如北柴胡横切片加 1 滴无水乙醇 - 浓硫酸 (1:1) 液,在显微镜下观察可见木栓层、栓内层和皮层显黄绿色 ~ 蓝绿色,示北柴胡的有效成分柴胡皂甙存在于这些部位。
4. 微量升华
利用生药中所含的某些化学成分,在一定温度下能升华的性质,获得升华物,在显微镜下观察其结晶形状、颜色及化学反应作为鉴别特征。如大黄粉末升华物有黄色针状(低温时)、枝状和羽状(高温时)结晶,在结晶上加碱液则呈红色,可进一步确证其为蒽醌类成分。薄荷的升华物为无色针簇状结晶(薄荷脑),加浓硫酸 2 滴及香草醛结晶少许,显黄色至橙黄色,再加蒸馏水 1 滴即变紫红色。牡丹皮、徐长卿根的升华物为长柱状或针状、羽状结晶(牡丹酚)。斑蝥的升华物(在 130~140℃ )为白色柱状或小片状结晶(斑蝥素),加碱液溶解,再加酸又析出结晶。
另外,显微鉴定还包括显微常数测定和显微定量。显微常数测定主要指用于叶类生药鉴定的栅表细胞 比、气孔数、气孔指数、脉岛数和脉端数等。