丁香实验_LOGO
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

FLASH色谱技术

互联网

2358

    1978年,Sill发明了FLASH色谱,文章发表在J.O.C上,从此FLASH色谱方法得以建立,新的设备也不断涌现,在国内,大连理工大学的彭勤纪教授自国外归国后,引进了该技术并进行了系统综述,发表在《化工进展》上,该文章首次将FLASH色谱译为“快速色谱”。狭义的快速色谱是指用压缩气体产生压力,加速流动相洗脱速度的低压短柱制备液相色谱系统,广义的快速色谱系统是指一切输液方式的中低压液相色谱系统。快速色谱有人还译为“闪式色谱”“FLASH色谱”。
    经过20余年的发展,FLASH色谱已经广泛被人使用,成为常规的纯化分离设备,如葛兰素公司,辉瑞公司的研究人员都拥有数百套FLASH色谱装置,世界上也有多家仪器厂商提供全套的FLASH色谱装置:如Biotage公司,Gyan公司,ISCO公司,上海科哲生化公司等。
    FLASH色谱脱胎于开口玻璃柱色谱,主要用于天然产物,有机合成产物的分离纯化。古典的FLASH色谱由玻璃柱,贮液瓶,压缩空气调节阀组成,Aldricn公司,Baker公司都有相应的产品。该类型成本低,便于观察,但压力低,易破损。现在许多实验室在玻璃柱子顶端放置一个加压皮球,属于同类产品。经过改进,形成了经典FLASH色谱系统。由输液压力罐、流量调节阀、FLASH预装柱、上样装置组成,设备紧凑,压力高,使用方便,重现性高。经典的FLASH色谱仍使用气压加压,压力范围约0-7bar,柱长约15cm,填料粒度为40~60。可固体与液体上样,手工收集流分。
   最近,因为科研竞争的加剧与实验室人力成本的增长,要求更高的自动化程度与分离速度,产生了自动化FLASH色谱,装置带有柱、色谱泵、检测器、自动馏分收集器、工作站,有的仪器还有梯度洗脱系统与柱切换系统、自动进样系统,可自选优化条件,实现无人操作,极大的降低了人力成本,加快了开发速度。目前国内有人使用蠕动泵输液,用有机玻璃柱分离,严格上说不能于用有机相小分子分离,只能用于生化分离,否则会损坏仪器。
色谱用于制备,拥有以下优点:
1、速度快,一般为开口柱色谱分离时间的1/8,节省时间,样品变化分解慢
2、制备量大,比同样直径的HPLC制备柱,至少可多上一倍量样品。
3、成本低,首先仪器设备低于HPLC;其次,使用溶剂比玻璃柱节省,硅胶柱可多次使用,节省硅胶用量。
4、使用简单,不需要特殊溶剂处理,样品可以干法上样,人员不需要经过特殊培训。
色谱的效果主要取决于洗脱溶剂的优化与柱子装填效果,在处理与制备HPLC关系时,要遵循以下原则:
(1)能只用FLASH色谱时,就不用制备HPLC
(2)要先用FLASH色谱,纯化再用制备HPLC
其它的使用技巧还有:
①先用TLC选反溶剂、负载量
②使用短粗柱(直径:长度<=1:7)

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序