电泳仪

将两个电极插在电解溶液中，通上直流电，带电颗粒在电场力作用下向所带电荷相反的电极泳动，即正离子则向负极移动，而负离子向正极移动，这种现象就是我们熟悉的电泳现象，也称“电泳”。能够给电泳装置提供一定电压、电流条件的稳定直流电流装置称“电泳仪”。许多重要的生物分子如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都含有可电离基团，在非等电点条件下均带有电荷，在电场力的作用下，它们将向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳技术就是利用样品中各种分子带电性质、分子大小、形状等的差异，在电场中的迁移速度不同，从而对样品分子进行分离、鉴定、纯化和制备的一种综合技术。目前电泳技术已广泛应用于生物化学、分子生物学、药学、食品、工业、农业、卫生及环保等学科。电泳仪包括电源和电泳槽两部分。

（一）电泳槽

电泳槽主要用于盛放缓冲液、电极、滤纸等。一般用有机玻璃或玻璃胶制成，其种类很多，有圆盘电泳槽、垂直电泳槽（单、双）、多用途电泳槽、薄层等电点聚焦电泳槽、琼脂糖水平电泳槽、微型垂直电泳槽、微型卧式多用途电泳槽等，可根据实验要求选择。

（二）电源

电泳电源一般是直流电源，种类较多大致分为以下几类。

1． 普通直流电源　这种电源不稳压也不稳流，它是直接通过整流电路把交流电源变为直流电源。

2． 稳压直流电源　相对普通电源，当交流电电压或负载电流发生变化时，整流器输出电压也会随之发生变化。但许多电子设备、精密仪器需要直流电压，所以必须采用直流稳压电路。直流稳压电路与整流器、滤波器组合在一起构成直流稳压电源。一般用于对稳压、稳流不太高的电泳中。

3． 稳流稳压电源　一般在电泳过程中，最好能维持电压或电流的稳定。在某些情况下稳流比稳压使用要多一些。电流不变，液体蒸发就少，在室温变化较大时用稳流得到的结果重复性较好。在电压高时，泳动较快，短时间可得到清楚的电泳谱。电压高易产生大量的热，因蒸发严重等因素使移距缩短。故应根据电泳的要求选择合适的电源。

4. 三恒（恒压、恒流、恒功率）电源　通常电泳仪仅有两个参数即电压和电流，现已出现了电压、电流、功率可控的三恒电泳仪。这种电泳仪大大提高了分离分析水平。

现以常用于蛋白、核酸电泳的普通稳压稳流EPS100型电泳仪为例介绍其使用方法。

（三）操作步骤

1． 首先确定仪器电源开关应处于关闭状态。

2． 连接电源线，确定电源插座是否有接地保护。

3．将黑红两种颜色的电极线对应插入仪器输出插口，并与电泳槽相对应插口连接，一定要正极接正极，负极接负极 （如果发现电极插头与插口之间接触较松，可以用小改锥将插头的簧片向外拨一下）。

4． 确定电泳槽中的试剂配制是否符合要求。

5． 打开电泳仪左侧的电源开关。

6． 按“功能键/设定键”选择电压、电流、时间，配合“上调”、“下调”电压调节旋钮或电流调节旋钮调到所需电压或电流。如果不熟悉如何预置电压电流，可以先确定是恒压输出，还是恒流输出。如果是恒流输出，则将电流调节为0，将电压调至最大，然后开机，此时缓缓调节电流调节旋钮，直到所需电流值。如果是恒压输出，则将电压调为0，将电流调为最大，然后开机，缓缓调节电压旋钮至所需电压值。注意，电源在任何情况下只能稳定一种参数（电压或电流），电压电流之间的关系符合欧姆定律。

7. 按下“停止/输出键”，电泳仪开始工作，如要中途中断电泳，再按下“停止/输出键”。

（四）注意事项

1． 电极连接一定要正极接正极，负极接负极。

2． 电泳仪与电泳槽联好后，一定要先倒上电解液，上好样品后，再设定条件通电电泳。

3． 调电流、电压时，不要超出额定范围，在电泳过程中，电泳装置如有异常发热，立即关闭电泳仪。

4． 在电泳过程中不能裸手接触电极、电解液，电泳完毕后一定要拔出电极，关闭总电源。

5． 常用电泳仪一般均有两组并联输出插口，可以同时接两个电泳槽，但要求这两组电流之和不超过仪器的最大值。此时最好采用稳压输出，以减少两槽之间的相互影响。

6． 如发现只有电压显示而电流输出为零，应检查输出端到电泳槽之间是否断路。

7. 使用中发现异常情况应立即关机，如果是仪器故障，应请维修人员负责检修。

 

                                                       （陈健康）