吞噬细胞的功能检测的意义
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1.中性粒细胞吞噬功能的检测
较早应用的方法为N试验,即中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗剧增、耗氧量增加、糖代谢增强,致使糖代谢的中间产物6-磷酸葡萄糖增多医学教育网搜|集整理,并在己糖途径中氧化脱氢,脱下的氢可被胞浆中的硝基蓝四氮唑(nitroblue tetrazolium,N)所接受,使原来淡黄色的N还原成蓝黑色的沉淀物,沉积在胞浆内。试验时取抗凝血与等体积N混合,37℃温育一定时间后推片,经瑞氏染色后镜下计数百分率,正常人为10%左右,全身性细菌感染患者可见升高。此外,根据细胞的吞噬作用,将抗凝血与等量5×107/ml的菌液混合,经37℃温育一定时间后推片、染色,于油镜下观察细胞吞噬细菌的情况并计算吞噬率和吞噬指数。
吞噬率=【吞噬细菌的细胞数/中性粒细胞总数(200个)】×100%
吞噬指数=(200个粒细菌吞菌总数/200个中性粒细胞)×100%
2.大吞噬细胞的检测
①巨噬细胞吞噬功能的检测:巨噬细胞具有吞噬大颗粒异物的特性,因此常选用鸡红细胞、白色念珠菌、酵母菌等作为吞噬颗粒。将通过斑蟊发泡法获得的细胞与鸡红细胞悬液于体外37℃温育一定时间,离心后取细胞涂片染色,镜检计算吞噬百分率和吞噬指数即可估计病人巨噬细胞的吞噬功能。
②巨噬细胞其他功能的测定:巨噬细胞具有多种胞内和胞外酶,也可分泌一些可溶性因子,这些物质在一定程度上可反映该细胞的功能状态。胞内酶通过细胞化学染色法检测,例如最常用的酸性磷酸酶及特异性酯酶的测定医学|教育网搜集整理。溶菌酶是巨噬细胞的一种胞外酶,其可在体外溶解细菌,若将血清与一定量细菌悬液混匀于比色杯内,经光电比色后记录每分钟光密度变化百分率,与标准曲线相比即可得出标本中血清溶菌酶的含量。