抗血清制备法-生化检验

抗血清制备法：

抗血清指含有抗体的血清。

传统的抗血清制备方法是将某种抗原通过多次注入动物，数十天后或数月后，采集动物血，立即分离出血清。此抗血清在保存或应用前必须作效价和特异性鉴定及纯化。

（一）免疫动物的选择免疫动物的选择基本要求：

1.抗原与免疫动物的种属差异越远越好。

2.动物必须适龄、健壮、无感染、体重合乎要求。

3.不同动物对同一免疫原有不同的免疫应答表现。因此针对不同性质的免疫原，选用相应的动物。蛋白质抗原大部分动物皆适合；甾类激素多用家免；酶类多用豚鼠。

4.抗血清要求：为R（rabbit）型或H（horse）型血清。R型抗血清是以家兔为代表的小型动物产生的抗血清，能和很小量抗原结合形成沉淀线，而H型抗血清则以马为代表的大型动物产生的抗血清，较少用于沉淀反应医学|教育网整理。

此外需要制备大量免疫血清时，应选用马、绵羊等大动物；若需要量不多，则选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。

（二）免疫方法及途径

1.免疫原的注射剂量：应考虑抗原性强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。抗体需要量多，时间间隔长，剂量可适当加大。

2.免疫途径：通常有静脉、腹腔、肌肉、皮内、皮下、淋巴结及足掌等。若抗原宝贵可采用淋巴结内微量注射法；半抗原宜皮内多点注射。

3.免疫方案：根据设计的目的要求、抗原性质、佐剂的种类来制定免疫方案。可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。

4.抗体产生阶段：可分静止期（约2天，血中尚无抗体）；指数期（约4天左右，抗体迅速上升）；稳定期（约2～4周，抗体保持一个稳定水平）；下降期（约几个月后，此时抗体缓慢下降）四个阶段。

（三）动物采血法动物采血法有颈动脉放血法、心脏采血法、静脉多次采血法等。