2011年检验技士考试辅导免疫分析中常用的荧光染料与标记染色介
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<font>2011年<a target="_blank"><u>免疫</u></a>分析中常用的荧光染料与标记染色介绍<br /> (一)免疫荧光标记最常用的荧光染料<br /> 最常用的染料有FITC和藻红蛋白类(PE)及罗丹明等。<br /> FITC(异硫氰酸荧光素):绿色530nm;<br /> PE(藻红蛋白):橙黄色575nm;<br /> PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白):深红色675nm;<br /> PI(碘化丙啶):橙红色620nm;<br /> 488nm波长的氩离子激光激发;<br /> APC(别藻青蛋白):红色660nm;<br /> 630nm波长的氦氖激光或红色二极管激光激发。<br /> (二)免疫荧光标记<br /> 常用的标记染色为直接免疫荧光染色和间接免疫荧光染色。在进行双参数或多参数分析时,常常需要进行荧光抗体的组合标记,目前已经有双色、三色以及四色标记|。<br /> (三)细胞自发荧光<br /> 自发荧光信号为噪声信号,在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中,对于结合水平不高的荧光抗体来说,如何提高信噪比是个关键。一般说来,细胞成分中能够产生自发荧光的分子(例如核黄素、细胞色素等)的含量越高,自发荧光越强;培养细胞中死细胞/活细胞比例越高,自发荧光越强;细胞样品中所含亮细胞的比例越高,自发荧光越强。 </font>