霍乱弧菌及其检验

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1．分类

（1）血清分型 霍乱弧菌（V.cholerae）有不耐热的H抗原和耐热的O抗原。前者为共同抗原，特异性低，后者具有群特异性和型特异性，是霍乱弧菌分群和分型的基础。根据O抗原的不同，霍乱弧菌现有155个血清群，其中仅O1群和O139群引起霍乱。O139血清群是新出现的型别，与O1群抗血清无交叉反应，但可与O22和O155血清群产生交叉反应，遗传学特征和毒力基因与O1群相似。O2血清群～O138血清群可引起人类的胃肠炎，无明显的季节分布，不引起霍乱流行，不被O1群霍乱弧菌多价血清所凝集，称之为非O1群霍乱弧菌，以往也称不凝集弧菌或非霍乱弧菌。

 

O1群霍乱弧菌的O抗原由A、B、C三种抗原成分组成，A是O1群的群特异性抗原，通过三种抗原成分的不同组合可分成三个型别:AB构成小川型、AC构成稻叶型、ABC构成彦岛型。彦岛型的抗原性不稳定，各型之间可以相互转换，以小川型和稻叶型为常见流行型别。

 

 

（2）生物型 根据生物学特性，O1群霍乱弧菌可分为古典生物型和El-Tor生物型，两个生物型具有相同的血清型。El-Tor生物型是具有溶血性的生物型，现发现El-Tor生物型细菌在环境中的抵抗力、存活力更强，在我国流行的以El-Tor小川型为主。

 

（3）噬菌体分型 根据霍乱弧菌对噬菌体的裂解模式不同进行分型，得到32个型，其中第Ⅳ组和第Ⅴ组噬菌体较为实用，前者以裂解古典生物型为主，后者仅对El-Tor生物型有高度特异性。

 

2．细菌特性

（1）形态染色 革兰染色阴性，呈弧形或逗点状，菌体尾端有一鞭毛，运动活泼，悬滴镜检可见穿梭状运动，患者粪便直接涂片可见弧菌纵列呈“鱼群”样，O139群弧菌亦为单端单鞭毛，有荚膜。

（2）培养特性 需氧或兼性厌氧菌，在16～44℃均可生长，最适生长温度37℃；营养要求不高，在普通培养基上生长良好，耐碱，在pH6.8~10.2范围均可生长，一般增菌培养常用pH8.4～8.6的1％碱性蛋白胨水进行选择性增菌。常用的选择性培养基有硫代硫酸钠-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS平板），霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色；4号琼脂和庆大霉素琼脂平板，因含亚碲酸钾，霍乱弧菌在其上生长将培养基中的碲离子还原成元素碲，形成灰褐色菌落。血平板上菌落较大，El-Tor生物型可形成β溶血环。可在无盐培养基上生长，但在含有高于60g/L氯化钠的培养基上不能生长；O139群霍乱弧菌能在无盐及30g/L氯化钠蛋白胨水中生长，不能在80g/L浓度下生长。

（3）生化反应 氧化酶、明胶液化和吲哚试验阳性，发酵蔗糖和甘露醇，赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阳性，精氨酸双水解酶阴性。霍乱弧菌古典生物型和El-Tor生物型的区别见表12-1。

 

 

（4）抵抗力 霍乱弧菌对干燥、热、酸和消毒剂均敏感，但在自然环境中存活时间较长， O139群霍乱弧菌在水中存活时间较O1群霍乱弧菌长。

                   表12-1 霍乱弧菌古典生物型和El-Tor生物型的区别

 

 

 

 

特征	古典生物型	El-Tor生物型
羊红细胞溶血	-	D
鸡红细胞凝集	-	+
VP试验	-	+
CAMP试验	-	+
多粘菌素B敏感试验	+	-
Ⅳ组噬菌体裂解	+	-
Ⅴ组噬菌体裂解	-	+

注：+，≥90％阳性；-，≥90％阴性；D，10%～89%阳性。