微生物鉴定常见生化反应及应用价值

<center>  </center>

明胶液化试验

　　(1)原理：某些细菌可以产生一种胞外蛋白水解酶(明胶酶)，能使明胶分解为氨基酸，使明胶失去凝固能力而液化，因而使半固体的明胶培养基成为流动的液体。

 

 

　　(2)方法：将待检菌接种于明胶培养基中，22℃培养7d或更长时间，每天观察结果有无凝固。

 

　　(3)结果：如无凝固，则表示明胶已被水解，液化试验阳性。如凝固，则继续培养。

 

 

　　(4)应用：肠杆菌科细菌的鉴别，如奇异变形杆菌、普通变形杆菌、沙雷菌属和阴沟肠杆菌等到能液化明胶，肠杆菌科中的其它细菌很少液化明胶。有些厌氧菌如产气荚膜梭菌、脆弱类杆菌等也能液化明胶。另外，许多假单胞菌也能产生明胶酶而使明胶液化

 

吲哚试验(靛基质试验)

 

　　(1)原理：某些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨水中的色氨酸产生吲哚，当加入吲哚试剂(对二甲氨基苯甲醛)后则形成红色的玫瑰吲哚。

 

　　(2)培养基：蛋白胨水培养基。

　　(3)方法：将待检菌接种于富含色氨酸的蛋白胨水培养基中，35℃孵育24~48h，沿试管壁慢慢加入吲哚试剂，观察结果。

　　(4)结果：于两液面接触处出现红色为阳性，无色为阴性。

　　(5)应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定，如大肠埃希菌与产气肠杆菌，肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌等的鉴别。

 

硫化氢试验

 

 

　　(1)原理：某些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸产生硫化氢，硫化氢遇亚铁离子或铅离子则结合形成黑色沉淀物(硫化铁或硫化铅沉淀)。

　　(2)培养基：醋酸铅培养基。

　　(3)方法：将待检菌穿刺接种于醋酸铅培养基中，于35℃孵育24h -48h，观察有无黑色沉淀出现。

　　(4)结果：培养基变黑为阳性，不变为阴性。

 

　　(5)应用：主要用于鉴别肠杆菌科中属及种的鉴别，如沙门菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属、爱德华菌属等为阳性，其它菌属大多为阴性。但沙门菌属中亦有部分硫化氢阴性菌株，如甲型副伤寒、仙台、猪霍乱沙门菌等。

 

 

尿素分解试验

　　(1)原理：某些细菌具有尿素分解酶，能分解尿素产生大量的氨，使培养基呈碱性。

 

 

　　(2)培养基：尿素培养基。

　　(3)方法：将待检菌接种于尿素培养基，于35℃孵育18~24h小时观察结果。

 

 

　　(4)结果：培养基呈碱性，使酚红指示剂变红为阳性，不变为阴性。

　　(5)应用：主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。奇异变形杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性，另外雷氏普罗威登菌和摩根菌为阳性，而斯氏和产碱普罗威登菌阴性。