HBsAg检测：滴加显色剂后不混匀观察结果可避免假阳性

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我们在检测乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)中发现一现象,即加显色剂后未混匀时,有些反应孔内的侧壁上有一显色点,其颜色比较集中,然后逐渐向周围扩散,而其他阳性孔内的颜色却均匀地散布在孔周围。将其混匀后,目测其颜色相当于弱阳性或阳性不等,用同样的检验方法复查后其结果却都是阴性。观察其标本,发现无论溶血或者不溶血,都有此现象。后来我们在滴加显色剂后采用先目测观察结果的方法,发现上述现象166例,现报告如下。

1　方法

 

酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检查 HBsAg,上海荣盛生产的试剂盒,严格按照厂家所附说明书操作,机洗或手工洗涤完成后,垂直检测孔中心滴加显色剂 B后,这时不混匀,小心放置 37℃, 15min后目测结果。当发现某孔壁上有一比较集中的显色点时,作好记录,再摇混匀,酶标仪读数,并复查其结果,方发出报告.

2　结果与讨论

总查出阳性6861例,而发现以上现象166次,占阳性结果的2. 4%左右。在溶血或混有血球的标本中发现102次,无溶血标本中发现64次。混匀后目测结果,其颜色深浅不一,酶标仪测 OD=0.150± 0.056。通过本资料可知,如果在滴加显色剂后先混匀后报结果,则可发生2.4%的假阳性。引起假阳性结果原因很多,用ELISA法检查HBsAg,标本成分与反应物非特异性结合或吸附于孔壁上及洗板不干净都可引起假阳性结果。有报道标本溶血可引起假阳性,在本实验中发现,标本无溶血也可出现假阳性结果。在采用ELISA检查时,我们建议,在滴加显色剂后,先目测观察结果再混匀,当出现上述现象时复查其结果,这样可避免假阳性结果所带来的不必要的麻烦。