【求助】pkc亚基激活怎么表现,如何检测?
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呵呵,希望大侠们,大牛们,前辈们不吝赐教。。。。:P
可以讲具体一点吗?
谢谢楼上的关心,我现在要检测pkc三个亚基δ,ε,ζ在用0.2uM的PMA(pkc的激动剂)后如何被激活?(是被磷酸化呢?还是蛋白量表达增加?或者别的什么?)怎样检测这种激活?(如果是前两个,我想用western blot因为我现在只会这个技术)
哈哈,技术很多呢,WB是经典金标准,但是现在还有很多新的方法,哈哈哈哈,其中有些可以做单细胞水平的检测呢,俺不打广告
ffyy8888,你的意思是WB就能搞定,那你知道这三个亚基激活怎么表现么?
pkc的亚基的活化方式不同,你最好能查早期的英文文献以及有关理论再动手吧。蛋白的活化方式有多种,比如磷酸化水平的变化,酰基化水平的变化,蛋白水平高低的变化,还是在细胞内不同组分间的移位等;毕竟涉及到你的课题,如果这些理论都要问别人,不如你去看几篇综述好过,万一别人错误的观点影响了你的实验那就惨了,具体的技术别人可能帮你。
谢谢michaelmichael,我会继续努力,貌似解决了一部分。
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