正相硅胶反相洗脱色谱仪固定相和流动相简介

正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱性药物的保留主要是离子交换机理，不需反相高效液相色谱仪中复杂的处理手段，碱性药物保留时间大大缩短，拖尾改善，峰形对称，能同时分析极性范围很大的一类药物。

一、固定相：

采用未改性的原形硅胶为固定相。

以普通硅胶作固定相简单方便，不需 HPLC 众多的键合相就能达到满意的分离效果。在高 PH 值（PH＞8）的水－有机溶剂混合液中，固定相稳定，硅胶不溶于高浓度极性有机溶剂和高pH值的流动相中，可使用数月不影响柱效。

二、流动相：

以水性溶液作流动相。

常用的流动相为甲醇－水相缓冲液和乙腈－水相缓冲液。合适的缓冲剂有三乙胺、甲酸铵－氨水、高氯酸铵－氨水、醋酸铵－氨水和磷酸氢二铵－磷酸等。

由于正相硅胶反相洗脱色谱仪利用被测组分与硅醇基相互作用，因此不需要加硅醇基掩蔽剂等特殊添加剂，仅用一两种洗脱液就能对大范围内的碱性药物进行分离分析。

由于流动相中含的三乙胺会吸附在硅醇基上，很难用甲醇清洗，所以每次做完样品，先用 0.1% 冰乙酸冲洗 15～20 min，洗去三乙胺，然后再用甲醇冲洗 20min。经这样处理后，柱压可长期保持不变，达到保护色谱柱的目的。