细菌和细胞培养的消毒设备

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细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的试剂、器皿及实验用具，应严格灭菌，有的实验还要求没有核酸酶的污染，故应将实验器械，试剂等进行高压消毒。对于经过导入DNA重组 分子的菌株，操作后必须进行严格的高压消毒灭活处理。

大批实验物品、试剂、培养基等可以使用大型消毒器进行消毒。一些不能经受高压、高温消毒的试剂可用滤器滤膜除菌，器皿可用紫外线照射、75%乙醇或0.1%的十二烷基硫酸钠(SDS)浸泡消毒。所有的细胞培养 、细菌培养的操作，都应在紫外线消毒后的超净工作台中进行。

下面介绍立式自动压力蒸汽灭菌器(LDZX-40BI)的使用方法。

1.使用方法

(1)开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈。

(2)通电：连接自动进水装置。接通电源，将控制面板上电源开关按至ON处，若水位低(LOW)红灯亮，蒸发锅内属断水状态;缺水(LACK)黄灯亮，电源已正常输入。

(3)加水：打开水源，水位达到低水位，控制面板上低水位红灯和缺水黄灯相继灭，加热(1-绿灯)亮，继续加水至高水位(HIGH)绿灯亮，自动停止加水。

(4)堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过200mm×100mm×100mm为宜，各包装之间留有间隙，堆放在金属框内，这样有利于蒸汽的穿透，提高灭菌效果。

(5)密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，使锅盖下压，充分压紧。

(6)设定温度：通电后数显窗灯亮，上层为红色，显示温度，下层为绿色，设定温度和时间。先按控制面板上确认键，绿色数显闪烁，进入温度设定状态。按一次移位键 所指相应位置闪烁，根据所需数据位置进行(单项循环)移位。按△增加键或??减少键，进行所需温度设定。设定完毕，按二次确认键，进行温度确认。

(7)设定时间：按一次确认键，将温度设定切换成时间设定;再按一次移位键，所指相应位置闪烁，根据所需数据位置进行移位;按增加键或减少键，进行所需时间设定。设定完毕，按二次确认键，进行时间设定确认。时间采用倒计时，当灭菌锅内温度达到设定温度，定时器开始倒计时。

(8)灭菌：在加热初，将下排汽阀打开至垂直位置;下排汽阀待蒸汽冒出时，压力表显示指示为100℃时，将下排汽阀推向水平关闭位置;留有微量蒸汽逸出，以控制总汽流量的15%为宜。使用最高灭菌温度为124℃～126℃，压力在0.145Mpa～0.165Mpa范围内属于安全阀设定数，超出压力部分，安全阀将自动泄压，并开始计数灭菌所需时间。灭菌完成，电控装置将自动关闭加热系统，伴有蜂鸣提醒;并将保温时间切换成END显示;此时，将控制面板上电源开关按至OFF处;关闭电源，停止加热待其冷却。

(9)干燥：物品灭菌后需要迅速干燥，须打开放汽阀和下排汽阀，将灭菌器内的蒸汽迅速排出，使物品上残留水蒸汽快速挥发。

(10)将盖开启，取出已灭菌物品。关闭水源，打开下排水阀，排尽灭菌室的水与水垢，以备下次使用。

2.注意事项

(1)堆放灭菌物品时，严禁堵塞安全阀的出汽孔，必须留出空位保证其空气畅通，否则安全阀因出汽孔堵塞不能工作，造成事故。

(2)灭菌液体时，应将液体灌装在硬制的耐热玻璃瓶中，以不超过3/4体积为好，瓶口选用棉花纱塞，切勿使用未打孔的橡胶或软木塞，特别注意，在灭菌液体结束时不准立即释放蒸汽，必须待压力表指针回零位方可排放余汽。

(3)对不同类型，不同灭菌物要求的物品，切勿放在一起灭菌，以免顾此失彼，造成损失。