【讨论】关于miRNA inhibitor加胆固醇尾在细胞转染中的应用
丁香园论坛
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有没有人在细胞转染中应用加硫代硫酸修饰的胆固醇尾的miRNA inhibitor,加胆固醇文献中说是for delivery in vivo,硫代硫酸是为了stability,那在转染细胞的时候胆固醇会不会对转染效率造成影响,转染试剂用Lipofectamine RNAI MAX还是Lipofectamine 2000?有没有人比较过这种修饰的inhibitor与2-OMe修饰的inhibitor在细胞中对对应miRNA抑制效率的差别。因为我们实验室用上海吉玛公司合成的2-OMe修饰的inhibitor的抑制效率只有40%作用,想订购用于体内实验的这种硫代硫酸修饰加胆固醇尾的inhibitor,但是吉玛那边一直没有细胞水平这两者转染相关的资料。请问各位前辈有没有这方面的资料。
硫代硫酸修饰加胆固醇尾的inhibitor一般做体内的,但是体外应该没有问题,如果比较的话,使用硫代硫酸修饰加胆固醇尾的inhibitor应该效果好一些
版主,我之所以想换加强修饰的inhibitor,是因为我们这边的细胞株miRNA基础表达就很高,由于miRNA可能存在饱和效应,40%多的抑制率对miRNA抑制后的细胞功能分析及下游实验没有影响,所以想买硫代硫酸修饰加胆固醇尾的inhibitor试试,这之前想咨询下园子里的人看看有没这方面的经验借鉴。不过从版主的回答和那边技术支持的意见,感觉前景不乐观啊。
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