技术三:MACS(磁珠分选)相关产品(美天旎公司)
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一、MACS微珠(MicroBeads)
MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。微珠直径约有50nm,比细胞小200多倍,体积为细胞的百万分之一,光学显微镜下不可见。微珠由多聚糖和氧化铁组成,无毒性,对细胞无损伤,可以生物降解。MACS微珠与流式细胞仪兼容,不会影响细胞的光散射特性;磁性标记只占用20-30%的结合位点,不影响细胞的荧光抗体标记。此外,MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化;无需解离磁珠,可以直接进行后续实验:如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。
MACS微珠主要有三种:直标微珠、间标微珠、多选微珠。其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联,在第一次阳性分选完成后,与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来,阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。
MACS技术分选的CD8阳性T细胞(箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠)
二、MACS分选柱(Separation Column)
MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器,铁珠表面有亲水包被,因此不会损伤细胞。在磁场外MACS分选柱不带有磁性,但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时,分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍,足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞;磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用,从而提高分选纯度和回收率。手动操作在30分钟内可完成,自动分选仅需2.5-10分钟,得到的细胞可立即用于后续实验。此外,大多数MACS分选柱都是无菌包装,一次性使用,可以满足细胞培养所需的无菌条件。
三、MACS分选器(MACS Separators)
MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。与分选柱一起组成高强度的梯度磁场。根据应用范围分为研究用和临床应用的MACS分选器,根据操作方式分为手动和自动分选器。
1、MiniMACS分选器和OctoMACS分选器
MiniMACS分选器是专为手动分选动、植物细胞,细菌、病毒、细胞器和mRNA等分子而设计的。该设备价格低廉,快速分选,应用广泛,易于操作,是获得少量高纯度细胞的理想设备。OctoMACS分选器把8个MiniMACS分选器连在一起,可以在一台仪器上同时进行8个标本的分选。
MiniMACS |
OctoMACS |
2、MidiMACS分选器和QuadroMACS分选器
MidiMACS分选器是MiniMACS分选器的扩大版本,与LS和LD分选柱配合使用,可阳性选择或者去除大量高纯度细胞。QuadroMACS分选器把4个MidiMACS分选器连在一起,可以同时进行多个分选过程,或者同时进行多个样本分选,也可将一个大的样本分成数个部分同时分选。
MidiMACS |
QuadroMACS |
3、VarioMACS分选器
VarioMACS分选器有多种适配器,可以使用MS、LS、LD和CS分选柱。可用于阳性选择和去除分选:既可高纯度地分选出稀有细胞(如频率低至10-8),也可用来从细胞悬液中去除多达2×108非目的细胞。
4、SuperMACS II分选器
设计的SuperMACS II分选器专门用于大量细胞分选,一次分选的总细胞数大于1011,同时该仪器也适用于少量细胞的分选。
uperMACS II分选器备有三个适配器,除了μ分选柱和autoMACS分选柱外,其它所有各型MACS分选柱均可用于SuperMACS II分选器。
Super MACS II |
5、μMACS分选器
μMACS分选器是为分子生物学和蛋白生化分选设计的分选器。同时容纳4个μ分选柱,可以分选出高纯度分子,如mRNA、序列特异性核酸或者蛋白。
μMACS |
6、autoMACS分选仪
7、CliniMACS
分选种类 |
分选柱 |
容量 |
适配分选器 |
手动阳性分选或者强
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MS 分选柱 |
2X10
8
总细胞
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MiniMACS 、 VarioMACS 、 SuperMACS |
大细胞分选柱 |
2X10
8
总细胞
|
MiniMACS 、 VarioMACS 、 SuperMACS |
|
LS 分选柱 |
2X10
9
总细胞
|
MidiMACS 、 VarioMACS 、 SuperMACS |
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XS 分选柱 |
2X10
10
总细胞
|
SuperMACS |
|
手动去除分选 |
LD 分选柱 |
5X10
8
总细胞
|
MidiMACS 、 VarioMACS 、 SuperMACS |
CS 分选柱 |
2X10 8 个标记细胞 |
VarioMACS 、 SuperMACS |
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D 分选柱 |
10 9 个标记细胞 |
SuperMACS |
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自动分选 |
AutoMACS 分选柱 |
4X10
9
总细胞
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AutoMACS |
CliniMACS |
6-12X10
10
总细胞
|
CliniMACS |
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分子生物学分选 |
μ 分选柱 |
10μg mRNA |
μMACS |
M 分选柱 |
50μg mRNA |
MiniMACS |