免疫金银染色法（immunogold-silver taining，IGSS）
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【基本原理】
免疫金银染色法是利用银显影液，胶体金颗粒起着液化作用，使显影液中的银离子在还原剂（对苯二酚）存在情况下被还原成银原子，在金颗粒周围形成一个“银壳”，由于金颗粒的液化作用，使更多的银离子被还原，“银壳”增大，最后使抗原位置得以放大。
【试剂及材料】
（1）0．5%胰蛋白酶或胃蛋白酶：用0.05mol/L ，pH7.4 配制TBS
（2）1%的卵蛋白：用0.05mol/L ，pH7.4 配制TBS
（3）0.05mol/L ，pH7.4TBS
（4）一抗和金标二抗
（5）pH3.5枸橼酸缓冲液；枸橼酸2.25g， 枸橼酸三钠2.35g，加蒸馏水100ml溶解即成。
（6）硝酸银显色液：1%明胶液 60ml，pH3.5枸橼酸缓冲液10ml，对苯二酚溶液30ml（1.7g对苯二酚溶于30ml蒸馏水中），磁力搅拌混匀，临用前加入含42.5mg硝酸银的水溶液2ml。
【操作方法】
（1）石蜡切片常规脱蜡水合（细胞甩片、爬片或冰冻切片固定后用TBS洗）；
（2）于细胞、组织上铺满0.5%胰蛋白酶，37℃，消化30min，有些抗原较强的切片可不经这一步处理；
（3）TBS洗，加1%的卵蛋白，室温15min；
（4）TBS洗5min，加适当稀释的一抗（大约25ml），置湿盒内，4℃过夜；
（5）TBS洗三次，每次5min，加1%的卵蛋白，室温15min；
（6）TBS洗5min，，加适当稀释的胶体金标记的二抗，置湿盒内，4℃过夜；
（7）TBS洗三次，每次5min，再用蒸馏水洗；
（8）将切片放入硝酸银显色液，避光显色5-10min；
（9）用蒸馏水洗，常规脱水、透明、中性树胶封片；
【结果观察】
镜检，抗原抗体反应处呈棕黑色。
