转染的时候可以用加血清的培养基吗
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ayao0问:前几天学习做细胞脂质体转染
看师姐是用的加血清的培养基,整个过程比以前的方法简单方便了很多
不用过四个小时就去换液,可以过了48个小时看转染效率很不好,以前也有人用这种方法做过,很成功。
到底这种新的方法行不行的通,做的时候需要注意哪些问题
丁香园网友kikie认为:
用的是invitrogen的lipofectamine2000,说明书上明确说可以用含血清的培养基:
Prepare complexes in the plate and culture medium,in the presence or absence of serum.
但是过4~6小时还是要换液,为的是减少脂质体对细胞的损伤。
丁香园网友monica912认为:
这种方法是完全可以的,我经常这样做,没问题的。
只是转染后最好4~6小时或过夜就换液,目的就像楼上说的减少脂质体对细胞的损伤。换液时可以用无血清的培养液洗一下细胞(一定要轻),然后再加培养液。
丁香园网友biologychem认为:
我认为转染时最好换无血清培养基,因为这样可以让细胞饥饿一下,有助于随后转染时细胞对脂质体-质粒复合物的摄取,过4-8小时再换为正常培养基,减少脂质体对细胞的毒性作用,这样比较好.
丁香园网友pazj认为:
我的做法和biologychem 的一样,转染率很高的,我觉得很不错的,
转染时用血清培养基的这种方法,我没试过。