间接凝集反应原理及分类
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一、原理
可溶性抗原(或抗体)吸附于免疫学反应无关的颗粒(称为载体)表面上,当这些致敏的颗粒与相应的抗体(或抗原)相遇时,就会产生特异性的结合,在电解质参与下,这些颗粒就会发生凝集现象。这种借助于载体的抗原抗体凝集现象就叫做间接凝集反应(Indirect agglutination reaction)。
载体的存在使反应的敏感性得以大大提高。间接凝集反应的优点为:
①敏感性强:间接凝集反应是最敏感性的血清学反应方法之一,可以检测到微量的抗体和抗原;
②快速:一般1h~2h即可判定结果,若在玻板上进行,则只需几分钟;
③特异性强;
④使用方便、简单。
二、载体
具有吸附抗原(或抗体)的载体很多,如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物的红血球、某些细菌等。
良好载体有如下几点基本要求:
①在生理盐水或缓冲液无自凝倾向;
②大小均匀;
③比重与介质相似,短时间内不能沉淀;
④无化学或血清学活性;
⑤吸附抗原(或抗体)后,不影响其活性。
目前应用最广的是人的O型红血球和绵羊红血球。而后者应用更广,因为其来源方便。另外绵羊红血球的表面有大量的(约1000个以上)糖蛋白受体,极易吸附某些抗原物质,吸附性能好,且大小均匀一致。
三、间接凝集的分类
1、根据载体的不同,可分为间接炭凝、间接乳胶凝集和间接血凝等。
2、根据吸附物不同可分为间接凝集反应(吸附抗原)和反向间接凝集反应(吸附抗体)。
3、根据反应目的不同,又可分为间接凝集抑制反应和反向间接凝集抑制反应。
4、根据用量和器材的不同又可分为试管法(全量法)、凹窝板法(半微量法)和反应板法(微量法)。