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速率散射比浊法检测补体C3、C4

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补体(complement,C)是由近20种不同血清蛋白组成的多分子系统,约占血清球蛋白总量的10%。补体在血清中的含量相对稳定,不因免疫应答而增加,仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分,按发现的先后顺序而分别命名为C1-9。

补体是一个复杂的反应系统,除了溶解细胞和协助杀菌作用外,还可促进炎症反应,与其他生物活性系统有相互促进、相互制约的关系,这些关系的紊乱是导致许多疾病损伤的物质基础。

C3是一种β球蛋白,是补体中含量最多、作用最重要的一个组分,是补体两条主要激活途径的中心环节,有重要的生物活性作用,可在肝脏中产生。C4是由肝脏、巨噬细胞合成的,参与经典激活途径,是补体中含量仅低于C3的重要组分。常用检测方法为速率透射比浊法、速率散射比浊法等。

【检测方法】 速率散射比浊法

【方法学原理】 抗原(C3、C4)与抗体(抗C3、抗C4)在液相中可快速反应,形成的免疫复合物颗粒具有特殊的光学特性,使反应液出现浊度。速率是指单位时间内抗原、抗体形成免疫复合物的速度。随着时间的延长免疫复合物总量是逐渐增加的,而速率变化为慢+快一慢,其反应速率最快的某一时间称为速率峰。当反应体系中的抗体量过剩时,速率峰的高低只与C3、C4含量成正比,仪器将测得的速率峰值通过对应的标准曲线转换成相应的C3、C4浓度。

【标本准备】 空腹静脉血2ml,不抗凝。

【试剂】 免疫比浊仪配套C3、C4试剂盒,内含有稀释液、缓冲液、抗血清等,按说明书配制。

【仪器】 全自动特种蛋白分析仪。

【检测步骤】

1、标本处理,3 500rpm离心lOmin,分离血清。

2、根据操作程序进行样品测定:

(1)输入杯号;

(2)选择所测项目C3、C4;

(3)存盘;

(4)编程完毕后,将标本放人标本杯中,且放入标本盘中相应位置,将所做项目的试剂放人试剂盘中相应位置,确认无误后,开始运行特种蛋白分析仪。

【正常参考值】 C3:0.8~1.55g/L5C4:0.12~0.36g/L。

【注意事项】

1、试剂盒从冷藏环境中取出时应置室温环境中平衡。

2、试剂瓶盖打开时应注意打破瓶口的液膜,以防液感仪感应错误。

3、血清中若含有脂类应高速离心分离脂质,防止假浊度产生。

【临床意义】 在感染性疾病中,急性感染期可见C3、C4增高。由于补体在肝细胞中合成,所以重症病毒性肝炎、慢性病毒性肝炎,特别是转化为肝硬化后,C3、C4水平均下降。

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