BNP测定概述
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一、标本采集
由于BNP和NT-proBNP很少受体位改变和日常活动影响发生变化,故不存在日间波动,因此采血无需固定体位和时间。但糖皮质激素、甲状腺素、利尿剂、ACEI、β受体阻滞剂、肾上腺素拮抗剂等都会影响血浆BNP的浓度,因此心衰患者应该在药物治疗前采血测定BNP的基础值。
怀孕的最后三个月和分娩后即刻BNP水平亦可升高,但围月经期BNP无明显变化。
BNP只能用EDTA抗凝血浆测定,NT-proBNP可以用EDTA或肝素抗凝血浆或血清测定,只是EDTA抗凝血浆测定结果要比后两者低10%左右。NT-proBNP在血清、含aprotinin血清及EDTA抗凝血浆中25℃可稳定3天,4℃可稳定5天,-20℃和-70℃至少可稳定6个月。
BNP在25℃2小时即下降20%,4℃可稳定8小时。因此采集标本后应尽快检验|地带网搜集整理离心测定,以免测定结果受BNP降解的影响。
二、测定方法
IRMA法灵敏度和特异性高,且不需要分离纯化血浆,比RIA法快捷实用,但仍需花费5~36小时,不适用于全自动分析系统。
Abbott公司推出的BNP试剂采用双单克隆抗体、微粒子酶免疫法(MEIA)在Axsym仪上测定,每小时可以测定56份标本,Biosite公司的BNP-TRIAGE用于床旁快速定量检测,以荧光标记的抗体为基础,一份单独样本只需15分钟即可得出结果。
检测NT-proBNP主要有Roche公司的proBNP试剂。采用双多克隆抗体、三明治夹心原理,运用电化学发光法(ECLIA)在Elecsys2010上检测NT-proBNP,最小检测限可达0.6pmol/L。
三、参考值范围
由于在正常人群中BNP检测的研究较少,且各种BNP试剂尚未标准化,不同厂家试剂、不同测定方法所得结果迥然不同,故尚无普遍适用的参考值范围。
多项临床试验将BNP值100pg/ml作为分界值,临床应用时可作为参考。性别、年龄、种族、肾功能、肥胖和甲状腺功能等都可能影响BNP或NT-proBNP的浓度,对于上述人群应该分别建立无心衰时的正常参考值范围。