溶血对生化检验结果的影响
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【关键词】：溶血 生化检验 采血
溶血，是指红细胞破坏，血红蛋白溢出细胞外。常见于人为因素如不规范采血，或由于保存血液及运送分离过程中引起血细胞破裂，另一种是体内溶血，如溶血性贫血等。由于生化检测多采用分光光度法，因此溶血标本使细胞内容物混入血清，干扰光谱波长，一定程度下影响生化检测结果，不利于临床医生诊断。由此可见了解溶血现象对于检验项目的影响具有重要的意义
1、标本与方法：
1.1、制取标本：抽取我院50名体检者5ml静脉血液，分别置于两排试管中，每支试管2.5ml，其中一排试管采取人工方法使其溶血并贴置标签作对照组。
询问体检者有无既往病史，是否至少空腹8小时采血等，排除一切影响因素。
两排试管室温下放置30min后以3000r/min速度离心，10min后分离血清。正常血清无肉眼可见的黄疸，溶血，脂血现象。若对照组血清为淡红色，则标本溶血。
1.2、操作方法：采用长征复星CS-800生化分析仪，试剂由上海复星长征医学科学有限公司提供。标本检测前对生化分析仪做室间质控，检测每项试剂是否合格，如发现失控（在+-2SD范围外）应及时校正。按照仪器操作规程，分别对ALT、AST、GLU、TG、BUN、Cr、UA、CK、CK-MB、LDH、K + 等11项生化项目进行检测与比较。每份溶血血清和正常血清分别测定10次，标本各指标取均值，将正常标本均值与溶血均值对比观察。
统计学方法：数据采用SPSS11.0统计软件处理，均数±标准差表示计数资料，t检验表示组间计量资料，方差检验表示计数资料比较，有统计学意义的范畴为P＜0.05。
2、结果
经测定后溶血标本中GLU略低于正常血清，ALT、BUN、Cr、UA、TG结果检测较正常血清有轻微变化，差异无显著性（P>0.05）。K+ 、AST、CK、CK-MB、LDH测定结果明显高于未溶血标本，差异非常显著性（P<0.001）。溶血血清与正常血清生化测定对比观察结果见表1。
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表1 标本未溶血、轻度溶血、重度溶血状况下测得的结果均值
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|
项目 |
溶血前（均值） |
溶血后（均值）
|
结果 | |
|
ALT
|
21.4 |
22.1
|
↓ | |
|
AST |
27.6
|
42.8
|
↑ | |
|
GLU |
5.62 |
5.37 |
↓ | |
|
TG |
2.27 |
2.33
|
↑ | |
|
BUN
|
4.9 |
5.3 |
↑ | |
|
Cr
|
65
|
72 |
↑ | |
|
UA
|
275 |
283 |
↑ | |
|
CK
|
68 |
183 |
↑ | |
|
CK-MB |
19
|
37 |
↑ | |
|
LDH |
118
|
352
|
↑ | |
|
K+ |
3.9
|
5.1 |
↑ |
注：ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＣＫ、ＣＫ－ＭＢ、ＬＤＨ单位为Ｕ／Ｌ， ＧＬＵ、ＴＧ、ＢＵＮ、Ｋ＋单位为ｍｍｏｌ／Ｌ，ＵＡ、Ｃｒ单位为ｕｍｏｌ／ｌ
3、分析
AST、CK、CK-MB、LDH等心肌酶均属于细胞内酶，细胞内浓度远高于细胞外浓度，其中AST在红细胞中的活性是血浆的38倍，LDH胞内浓度为胞外3000倍，轻度溶血即带来显著影响，因此溶血标本不适用于心肌酶检测。K+胞内外浓度差约30倍，溶血对K+影响也较明显，电解质其他项目如Na+、Cl-因细胞外浓度远大于胞内浓度，影响甚微。蛋白类，甘油三酯，尿素，尿酸，肌酐影响则不明显。另外，因溶血导致LDH清浓度升高，直接影响糖酵解，进而使血糖浓度偏低。
4、讨论
溶血对标本影响机理分析
1、试剂多采用速率法，溶血使血红蛋白从红细胞中释放，通过非特异性吸附，影响过氧化物酶，从而引起测量误差。
2、细胞溶血使细胞内液释放出来，稀释待测酶浓度，带来轻微误差。
3、腺苷酸酶从红细胞中释放出来之后，所有的ATP肌酸类酸转化酶几乎都受到影响，这属于红细胞内外液之间的反应。
4、细胞内容物如脱氢酶一定程度上干扰其他酶生化反应。
原因及对策
溶血原因：溶血主要分为体内溶血和体外溶血。体内溶血分物理因素（如大血管手术），生物因素（恶性疟疾），药物毒性反应、配血不合引起的输血反应等因素。体外溶血又分为物理因素（如机械性破坏、冰冻）、化学因素（如血样接触活性剂）、代谢性因素（如遗传性疾病引起的红细胞脆性增加）。较为常见的有采血带带捆绑过久，采血不慎刺穿静脉导致采血过程不顺，注射器抽吸过猛导致气泡生成等。
因此，采血要求规范化操作，最大限度避免溶血现象发生。临床上，为对于工作人员须做到以下几点
1、扎实掌握基本功，保证静脉采血有较高的成功率。尤其是老年人，肥胖者尽量一次性采血成功。静脉穿刺多选用肘部正中静脉，婴幼儿肘部静脉较细，应进行颈部采血。
2、严格管理采血器具，禁止使用不合格产品，采血前检查标本试管。
3、采血带捆扎不宜过紧，尽可能使采血过程中捆扎时间<1min。
4、采血前务必将酒精及患者汗液擦拭干净，避免血液接触而溶血。
5、静脉采血应避开水泡，脓肿等皮肤损伤部位，防止混入组织液。
6、对静脉隐藏较深的成年患者，不宜过分拍打静脉。
7、采血时使针头斜刺入静脉，抽拉活塞杆动作要慢，使血液缓缓流入注射器，防止注射器内出现气泡。
8、若不慎穿血管导致血液抽吸不畅，应重新采血，。
9、新采集的血液不宜立即分离血清，室温下静止30min后离心，使离心机转速在3000r/min以下。
10、血液放置时间不宜超过4小时，如延误生化检测，可先将血液离心后分离血清，避免红细胞破裂造成溶血。
11、需要保存或运送的血液避免强烈震荡。
综上所述，溶血会引起一些生化检测项目结果的误差，对临床诊断造成不利影响。因此，提高从业人员的技术水平和专业精神、降低检验人员的失误和提高检验结果的准确性和可靠性对更好地服务于临床有着非常重要的意义。
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