经常做 western blot,您有了解过 CCD 时间积分吗
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CCD 积分时间就是曝光时间,就相当于普通胶片相机的快门打开~关闭的时间,积分时间越长,快门打开时间越长,进入相机到CCD 表面的光线越多,拍出来的图像越亮,亮到一定程度后,图像有部分或者全白,称为饱和或者过饱和。积分时间越短,图像越暗。应该根据环境光强,合理的选择和设置积分时间。
曝 光时间这个概念几乎是每个有摄影常识的人都懂得怎么调,但在化学发光实验中这个指标并不好调。这是因为化学发光是有时间效应的,通俗的说每时每刻发光值都 在变化,前一秒发光值比后一秒的要亮。
等我们在预览过程中调试清楚后再拍摄的话,因为后一时间的发光值的衰减而得不到清晰的照片。而在这个时候您需要一种 更灵活的图像处方式——电影模式。
电影模式简单的说就是分别把不同时间段拍摄的照片光强度叠加起来,得到一连串图片,再按需选取最合适的曝光图片无需预整曝光时间,举个例子:
总拍摄时间 10S,每张分别曝光 2S,总共拍摄 5 张照片。
第一张光亮度:=第一张光原始光亮度
(光亮度效果=曝光 2S)
第二张光亮度:=第一张光原始亮度+第二张原始光亮度
(光亮度效果=曝光 4S)
第三张光亮度:=第一张光原始亮度+第二张原始光亮度+第三张原始光亮度
(光亮度效果=曝光 6S)
...如此累推!
电影模式的好处是解决了做化学发光过程中预览和拍摄不一致的弊端,实现可见即可拍。
广州博鹭腾仪器仪表有限公司——分子影像专家