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红细胞沉降率的测定

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[目的与原理]

掌握测定红细胞沉降率的方法,并测定不同鱼类和患病鱼类的红细胞沉降率。

红细胞在循环血液中具有悬浮稳定性,但将加有抗凝剂的血液置于一垂直血沉管中,红细胞由于重力的关系,将逐渐向下沉降。通常以在第1小时末红细胞下降的距离作为沉降率的指标。

红细胞的沉降率在某些疾病加快,这主要由于红细胞能较快地发生叠连,使其总外表面积与容积之比减小,因而与血浆的摩擦力减小,下沉加快。红细胞叠连的形成,主要取决于血浆性质的变化,这种测定有助于某些疾病诊断。

目前测定红细胞沉降率常用的方法已有多种。本实验只介绍魏氏(Westergren)法。

[实验对象]

鲤、鲫或草鱼。

[ 试剂与器材]

魏氏沉降管,血沉架, 吸管 ,5ml注射器,8号注射针头,3.8%枸橼酸钠溶液。

[实验步骤]

1、准备一个容量为5ml的小瓶盛3.8%枸橼酸钠溶液0.4ml, 然后用注射器从鱼尾静脉或直接从心脏取血2ml,准确地将1.6ml血液注入小瓶内。随后颠倒小瓶3~4次,使血液与抗凝剂充分混匀,但需避免剧烈振荡,以免破坏红细胞。

2、用魏氏沉降管吸取上层抗凝血液到刻度“0”处,不能有气泡混入。擦去尖端周围的血液,将血沉管垂直固定于血沉架上静置,并记录时间。

3、1小时末,观察沉降管内血浆层的高度,并记下mm数值,该值即为红细胞沉降率(mm/h末)。

4、小心取下沉降管,用水洗涤,并晾干。

[方法评估]

(Westergren)法为测定红细胞沉降率的标准方法。

[应用意义]

血沉可用来表示红细胞悬浮稳定性的大小。红细胞沉降率受生殖周期、营养情况、化学物质、季节变化、疾病等影响。当有炎症反应时,血沉加快。

[注意事项]

1、本实验血液与抗凝剂的容积比规定为4:1,应用新配制的抗凝剂。

2、自采血时起,本试验应在2h内完毕,否则会影响结果的准确性。

3、实验用的器材应清洁、干燥。

4、若红细胞上端成斜坡形或尖锋形时,应选择斜坡部分的中间位置计算。

5、血沉的快、慢与温度有关。在一定范围内温度愈高,血沉愈快。故实验时室温以18~25℃左右为宜。

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