VITEK-32全自动微生物鉴定及药物敏感试验分析系统
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1. 工作原理
1.1 用途:VITEK-32全自动微生物分析系统,用于对临床标本分离细菌进行菌种鉴定及药物敏感试验分析检测。
1.2 检测原理:VITEK-32全自动微生物分析仪由真空充液泵/读数器/恒温器、电脑主机及打印机组成。真空充液泵三分钟内把样本注入试验卡中;读数器/恒温箱可同时容纳32个反应卡,自动恒定培养温度(35.5℃),每小时读取每张卡内反应变化数值;电脑主机负责分析资料的储存、系统的操作及分析程式的运作。分析仪自动进行细菌生化鉴定,VITEK试卡的反应池内含各种风干生化反应底物或抗菌药物,试卡由标准浓度菌液填充,然后放入测试架槽内,采用比色法/比浊法,应用动态学方法原理,读数器每小时光扫描测试卡,以获取卡片内样本在培养介质内生长变化值,自动检测每张卡片的反应情况,与数据库中的数据进行比较分析,达到系统预设的阈值时,自动报告检测结果。
1.2.1细菌鉴定:从临床标本分离并纯化的细菌,严格按无菌操作技术配制菌悬液、充液接种于鉴定卡内,放入VITEK-32全自动微生物分析系统读数器/恒温箱。测试卡内含有20~30多项生化反应试验,读数器每一小时通过光扫描并获取透光率变化值,随着细菌生长,读数器光扫描光线通过量也随之下降,计算机储存所获取的读数并进行分析,鉴定卡内每一孔的生化反应与其相应的域值相比较,等于或高于域值为阳性反应(+);反之,低于域值为阴性反应(-)。鉴定卡内的细菌经过一定时间培养后,卡中每一生化反应结果将与计算机数据库中的相应文件连接,计算机分析处理并将生化反应结果转换为概率值,阳性试验概率可直接从反应文件中取得,阴性试验概率则需:100 – 阳性百分概率。然后根据每一试验的概率值计算与反应文件中每一细菌分类单位的相似值,选择两个最大相似值按大小作为首先和次选鉴定结果,计算机按照每三项试验为一组,每三项试验阳性反应值依次分别为4、2、1,阴性反应值为0,以每组阳性反应值总和为一位数,得到一个10~11位数生物编码,经过计算机与数据库中的反应文件相比较分析处理,最终得到细菌鉴定结果。
1.2.2 药物敏感试验:待测试细菌经无菌操作技术配制成一定浓度的菌悬液,按一定比例倍比稀释并充液接种入药敏试卡,放入VITEK-32全自动微生物分析系统读数器/恒温箱。测试卡内含有15种左右不同浓度的抗菌药物,读数器每一小时通过光扫描并获取透光率变化值,随着细菌生长,读数器光扫描光线通过量也随之下降,计算机储存所获取的读数并进行分析,读数器以在零时的读数作为初始读数,初始读数和每一小时的读数变化以百分率表示。药敏卡内设有阳性对照孔,当阳性对照孔达到阈值,同时细菌鉴定结果一旦获得,全部孔的斜率开始计算,每一小时透光下降百分率以�2对数值绘制成生长曲线,计算机分析计算其生长曲线斜率,一旦某孔的斜率已确定,该药孔的斜率与阳性对照孔进行校正,得到校正斜率,校正斜率从0开始,“0”表示细菌未生长,“1”表示细菌生长等同于阳性对照孔。最后每一种药物以它的含药孔校正斜率之和作为它的复合斜率,每一孔药的复合斜率等于其在药敏卡中所占药孔的数目,计算机利用复合斜率即可计算出细菌对某种药物的最低抑菌浓度(MIC),获得的MIC与计算机数据库中判断文件比较,自动判别细菌对某种药物的敏感度。
2. 检测仪器与试剂
错误!未找到引用源。.1 仪器:VITEK-32全自动微生物分析系统,微生物数据管理软件系统中文电脑, VITEK 比浊仪(产品号:No.52 - 1210)。
2.2 试剂:
错误!未找到引用源。 鉴定卡:
卡名 中文名 鉴定范围
GPI 革兰阳性菌鉴定卡 葡萄球菌属、微球菌属、链球菌属、肠球菌属、气球菌、棒状杆菌属及李斯特菌和丹毒丝菌等
GNI+ 革兰阴性菌鉴定卡 肠杆菌科、弧菌科和非发酵菌
NFC 非发酵菌鉴定卡 假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、伯克霍尔德菌、丛毛单胞菌、鞘氨醇杆菌、弧菌属、气单胞菌属等
NHI 奈瑟菌嗜血杆菌鉴定卡 奈瑟菌属、嗜血杆菌属、莫拉菌属、布兰汉菌、金氏菌、加德纳菌等
BAC 芽胞杆菌鉴定卡 革兰阳性需氧芽胞杆菌
ANI 厌氧菌鉴定卡 放线菌、拟杆菌、真杆菌、乳杆菌、梭菌、消化球菌、消化链球菌等厌氧菌
YBC 酵母样真菌鉴定卡 假丝酵母菌、隐球菌、地霉菌、丝孢酵母菌、红酵母等深部真菌
错误!未找到引用源。筛选卡:
卡名 筛选范围
UID-3 尿道病原菌
EPS 肠道病原菌
错误!未找到引用源。 药敏卡:
卡名 中文名 种类
GPS 革兰阳性球菌药敏卡 GPS-101、102、SA、TA、TB等
GNS 革兰阴性杆菌药敏卡 GNS-506、NT、OP、F1、F2、F3等
注:药敏卡内含10~15种不同浓度梯度抗菌药物,药敏卡种类不同,其所含抗菌药物不同。
2.3 试剂贮存:室温(15 ~ 30℃),避光状态下贮存。每一个鉴定卡和药敏卡有有效日期,超过有效期不可使用。
2..4 仪器及试剂生产厂家:法国生物梅里埃公司。