实验前处理 | 人体脐带组织研磨优选流程

1. 时间：2019 - 10 - 11

2. 样品：人体脐带组织

3. 仪器：主机 TL2010S 中通量组织研磨仪（北京鼎昊源科技有限公司生产）

配件 2 ml 研磨管，12×2 ml 适配器（1 对），直径 5 mm 不锈钢研磨珠

4. 步骤：

① 将脐带组织分成等量的小块，分别装入 2 ml 研磨管中；

② 在研磨管中分别加入 2 颗直径 5 mm 的不锈钢研磨珠；

③ 在研磨管中分别加入 300μm 裂解液，盖紧管盖，置入 2 ml 适配器中，将适配器固定在 TL2010S 研磨仪的摇臂上；

④ 在 TL2010S 操作面板上设置实验参数：

Speed（振荡速度）：2000 次/分钟

Cycle（循环次数）：1 次

RunTime（研磨时间）：50s

启动研磨仪，一键自动研磨；

⑤ 研磨完全停止后，卸下适配器，取出研磨管，脐带组织已研磨成细腻的匀浆状；

⑥ 离心之后取上清液提取 DNA，进行后续实验。

研磨总结：

针对于脐带、胎盘等韧性较大的动物组织，在摸索最佳实验条件时，可以参照以下参数：

1. 研磨时加入适量溶液（裂解液或缓冲液）；

2. 选用直径 5 mm 或 6 mm 的研磨珠，2 ml 的研磨管中加入 2 颗；

3. 转速 1800 - 2000 次/分钟；

4. 研磨时间 30s- 60s，设定梯度时间，找出最佳研磨时间。

https://www.biomart.cn/infosupply/ 20481643.htm