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徒手切片实验

相关实验:徒手切片实验

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简介

徒手切片法是指手持刀片或剃刀,将新鲜材料或经固定的材料切成薄片,然后装片,用于显微观察的方法。此法设备简单、快捷,能及时观察到植物组织的生活状态和天然色彩。在做石蜡切片时,也可先用徒手切片法初步观察其结构,达到有的放矢的效果。同时,在植物组织化学研究上也常用此方法。该方法缺点是切片往往过厚,且厚薄不均匀,切片也不易完整。

材料与仪器

器材:

① 刀片(双面刀片或剃刀)

② 滴管

③ 毛笔

④ 培养皿

⑤ 载玻片

试剂:

① 切片材料

② 清水(乙醇或染料等)

步骤

徒手切片实验的基本过程可分为如下几步:

一、一般材料的徒手切片

植物的根、茎等长柱形器官或块茎、块根、果实等块状结构在切片时便于手持,是徒手切片的一般材料。对这类材料进行徒手切片的具体步骤如下。

(一)准备

取一小培养皿,盛适量清水(有时需用乙醇或染液等),准备好刀片(双面刀片或剃刀)、滴管、毛笔等工具。

(二)取材和整形

取待切片材料,用刀片将其切修为适合手持的形状。若为柱形器官,如幼根、幼茎等,可截取长度约为 3 cm 的一段;若为块状物,如块茎、块根等,可切成长约 3 cm,横截面约为 5 mm × 5 mm 的条形。材料整形时一定要注意实验所要求的切片方向。

(三)切片

以左手的 3 个手指(拇指、食指和中指)握持材料,材料的上沿应保持略高于食指,拇指略低于食指,中指顶住材料下端,在切片时配合食指和拇指向上推送材料。右手持刀片,以清水润湿刀面,将刀片平放在左手的食指上,刀口向内并与材料断面平行,右手手臂向后拉动(手腕保持不动),使刀片沿着食指侧沿自左前方向右后方滑行,将材料一次切下。切片过程如此反复,切下多片后,用滴管吸水将这些薄片冲入到准备好的培养皿中。

(四)装片与染色

用毛笔从培养皿中挑选薄而透明的完整切片,置于载玻片上,加水 1 滴,盖上盖玻片,制成临时装片。如果切片需要染色,可用以下 3 种方法:① 在培养皿中盛放适量的染液,将徒手切下的薄片直接浸入其中。② 切下的薄片浸泡在培养皿盛放的清水中,用毛笔捞起后放在载玻片上,加 1~2 滴染液进行染色。③ 切片先不经染色,直接以水装片,必要时从盖玻片边缘加 1 滴染液进行染色。

二、叶片或叶状体的徒手切片

对于过于柔软不易握持的材料,如叶片或叶状材料(如花瓣等)做徒手切片时,可釆用一些支持物夹住材料后再进行切片,这样不仅操作较为方便,而且能得到比较薄的切片。具体方法如下:先准备好刀片、毛笔及盛水的培养皿。将支持物(如马铃薯块茎、胡萝卜等)切成长约 2 cm、横截面约 5 mm × 5 mm 的条形,在其一侧切出深约 3 mm 的纵长切口。从叶状材料上剪下一宽约 2 cm、长约 4 mm 的长条,放入支持物的切口中。然后,将支持物连同材料一起做徒手横切,所切出的薄片移至盛水的培养皿中。用毛笔挑选最好的切片(不要附带支持物),置于载玻片上,以水封片。必要时也可进行染色。

来源:丁香实验

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