实验动物的标本采集

根据动物感染病毒的靶器官和排泄途径不同，采用相应的标本或组织，进一步进行病原学、细胞学、组织病理学、免疫学、生物化学或分子生物学的检测分析。

器材：

①孵育箱

②剪刀、镊子等

③注射器

试剂：

①材料：实验动物

②消毒剂（2.5％ 碘酒和 75% 酒精）

实验动物的标本采集几种方法基本过程如下：

1. 采血方法

(1) 大鼠、小鼠的采血方法：

①剪尾采血：适用于少量采血，如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后，将尾尖剪去约 5 mm，待血液流出后采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0.1 mL，大鼠约 0.4 mL；

②眼眶后静脉丛采血：一手拇指及示指抓住鼠两耳之间的皮肤固定，轻轻压迫颈部两侧，使眼球充分外突。取血管在眼角与眼球之间向眼底方向刺入，旋转切开静脉丛，血液即流入取血管中。小鼠一次可采血 0.2~0.3 mL，大鼠一次可采血 0.5~1.0 mL。短期内可重复采血；

③颈（股）静脉或颈（股）动脉采血：麻醉动物，剪去操作部位的被毛，作颈静脉或颈动脉分离术，根据所需血量，使用注射器或采血器；

④摘眼球采血：用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用摄子或止血钳迅速摘除眼球，迅速采集流出的血液。

(2) 豚鼠采血方法：

①耳缘切口采血：先将豚鼠耳消毒，用刀片沿血管方向割破耳缘，切口约长 0.5 cm，切口边缘涂上 20％ 的拘橡酸钠溶液，防止血凝，血自切口处流出，每次可采血 0.5 mL;

②背中足静脉采血：固定豚鼠，将其右或左后肢膝关节伸直，脚背消毒，找出足静脉，一手拇指和示指拉住豚鼠的趾端，一手将注射针刺入静脉，拔针后立即出血；

③心脏采血：用手指触摸，选择心跳最明显的部位，将注射针刺入心脏，血液即流入针管。

(3) 兔的采血方法：

①耳缘静脉采血：固定动物，去耳缘被毛，消毒。轻弹兔耳，使静脉扩张，用针头刺耳缘静脉末端，或用刀片沿血管方向割破一小切口，血液随即流出。本法是兔最常用的采血方法，可多次重复；

②耳中央动脉采血：在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央动脉。一手固定，一手持注射器，在中央动脉的末端，沿着与动脉平行的向心方向刺入动脉，血液进入针管。刺入部位应从中央动脉末端开始；

③颈静脉采血：方法见鼠颈静脉采血；

④心脏采血：使家兔仰卧，在第三肋间胸骨左缘 3 mm 处刺入。针头刺入心脏后，持针手可感觉到兔心脏有节律的跳动。

2. 脑脊液的采集

(1) 狗、兔脑脊液的采集：通常采取脊髓穿刺法，穿刺部位在两骼连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物麻醉后侧卧位固定，头尾部尽量弯向腰部，去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮肤，腰穿针垂直刺入，当有落空感及动物的后肢跳动时，针巳达椎管内，抽去针芯，即见脑脊液流出。如无脑脊液流出，轻轻调节进针方向及角度。避免脑脊液流出太快，以免形成脑茹。

(2) 大鼠脑脊液的采集：可采用枕大孔直接穿刺法。大鼠麻醉后，头部固定。去被毛、消毒。手术暴露枕骨大孔。由枕骨大孔进针直接抽取脑脊液。缝合皮肤，处理刀口。

3. 尿液的采集常用的采集方法较多，一般在实验前需给动物灌服一定量的水。

(1) 代谢笼法：此法较常用，适用于大、小鼠。将动物放在特制的笼内。一般需收集 5 小时以上的尿液，最后取平均值。

(2) 导尿法：常用于雄性兔、狗。动物轻度麻醉后，固定于手术台上，导尿管导尿。

(3) 穿刺膀胱法：动物麻醉后固定，在耻骨联合上腹中线上去被毛，消毒穿刺。

(4) 反射排尿法：小鼠被人抓住尾巴提起时出现排泄反射，故需采取少量尿液时，可提起小鼠，将排出的尿液接到带刻度的容器内。

4. 腹水的采集：抽取大鼠、小鼠的腹水时，抓取固定动物，使动物腹部朝上，消毒皮肤，针头在腹股沟和腹中线之间刺入腹腔，腹压高时腹水自然流出，腹水少时可用注射器抽取。

5. 胃液的采集：通过刺激，使胃液分泌增加，再用插胃管的办法抽取胃液。

6. 胆汁的采集：采集胆汁需要施行手术。

7. 胰液的采集：胰液的采集基本同胆汁的采集。