LFB 髓鞘染色法

劳克坚牢蓝(LuxolFastBlue,LFB)属于铜－酞箐染料，在酒精溶液中具有与髓鞘磷脂结合的染色特性。应用LFB髓鞘染色可以很好地显示出神经组织的髓鞘结构。

1、切片经蒸馏水清洗后，入0.1% LFB溶液，于60℃密封浸染8-16h。

2、经蒸馏水清洗后，入95%酒精。

3、以0.05%碳酸锂水溶液分色10s以上。

4、经70%酒精继续分色，直至显微镜下观察灰、白质区分清晰为止。

5、 蒸馏水洗片后，用0.25%焦油紫溶液加数滴冰醋酸染液复染10min。

6、70%酒精将复染颜色分至细胞核及尼氏体呈红色。

7、滤纸沾尽多余液体，入正丁醇2次漂洗脱水，每次脱水时间3-5min。

(8)二甲苯透明，中性树胶封片。髓鞘呈鲜蓝色，核呈深蓝色

1、切片若为石蜡切片，要在二甲苯中先脱蜡，再至无水乙醇。

2、0.05%碳酸锂水溶液分色应该在显微镜下进行，至背景呈灰色为止。70%酒精再次分色时，至背景无色为止。

1、LFB染色完后，可用焦油紫溶液或苏木素－伊红复染，这样能更好地显示出细胞的形态。

2、复染之后要入正丁醇漂洗脱水，这样染色效果更佳。

3、溶液配制：劳克坚牢蓝1g,95%酒精100ml,10%冰醋酸0.5ml。混匀后过滤，室温保存。

来源：《神经生物学实用实验技术》