α-酮戊二酸脱氢酶的测定实验
最新修订时间:
原理
材料与仪器
α-酮戊二酸脱氢酶
磷酸钾 MgCl2 α-酮戊二酸 焦磷酸硫胺素 K3[Fe(CN)6] 牛血清蛋白
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 实验混合物
0.02 ml 酶样品
30℃ 时,于 436 nm 处吸收值发生变化,ε436=755 l/(mol·cm)
注意事项
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常见问题
试剂:
0.1 mol/L 磷酸钾,pH 6.5
0.1 mol/LMgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)
0.5 mol/L α-酮戊二酸(α-酮戊二酸盐,Mr=190.1,二钠盐,0.95 g 溶于 10 ml 水中)
0.01 mol/L 焦磷酸硫胺素(ThDP,脱羧辅酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于 10 ml 水中),
0.1 mol/L K3[Fe(CN)6](Mr=329.2;330 mg 溶于 10 ml 水中)
1% 牛血清蛋白(BSA,100 mg 溶于 10 ml 水中)
<link />来源:丁香实验