原理
材料与仪器
I-Kl 溶液 浓 KOH 溶液 0.1%亚甲基蓝溶液 2%-3%盐酸(或乙酸)溶液
显微镜 摄子 解剖针 载玻片盖玻片滴管培养皿 吸水纸
步骤
绿藻门 Chlorophyta( 图 2-19-1)
绿藻门是藻类植物中种类最多的一大类群,分布极广,以淡水最多。其所含色素、细胞壁成分、贮藏营养(淀粉)、顶生鞭毛和高等植物相同,藻体为鲜绿色,被认为是高等植物的祖先。绿藻门植物的形态、结构和生殖方式各式各样。
1 衣藻属 Chlamydomonas( 图 2-19-lA)
隶属于团藻目,衣藻科。是能运动的单细胞藻类的代表。本属分布广泛,多生于有机质丰富的水沟、湿土表面或临时积水中,使水呈草绿色。用吸管吸取一滴培养液制成临时水封片(或衣藻永久玻片),先在低倍镜下观察,然后选择个体较大的用高倍镜观察。可见衣藻为球形、卵形、椭圆形或宽纺锤形的单细胞绿澡,细胞壁薄,具两条顶生等长的鞭毛。如运动过快,可在盖玻片一侧用吸水纸吸去多余水分或加入胶水使其运动减慢。
(1) 细胞结构:
①细胞壁:位于细胞的最外层。
②载色体:一个,多为杯状,占原生质体的绝大部分空间。
③眼点:红色,位于细胞前端侧面。
④伸缩泡:位于细胞前端的细胞质中,显微镜下为两个发亮的小泡
⑤蛋白核:多为一个,大型,埋藏在载色体基部。用 I-KI 染色后,蛋白核变成蓝紫色。
⑥鞋毛:将视野调暗,可看见不动或微动的鞭毛。由于吸碘鞭毛膨胀加粗,因而更为明显。⑦细胞核:由于较小,且被载色体遮挡,所以-般不易看清。
(2) 无性生殖和有性生殖
取培养缸底部的绿色沉积物制片,在显微镜下观察,可见有的衣藻失去鞭毛不能游动,细胞里有 2 、4 、 8 、 16个游动孢子,这是衣藻在进行无性生殖,此时的衣藻已转变成游动抱子襄。有性生殖不常见,如果观察到具 4条鞭毛和 2个蛋白核的衣藻,说明衣藻在进行有性生殖,有时在视野中可看见橘红色、壁厚并具有刺状突起的小球形体,这是衣藻的成熟合子。
2 小球藻属 Chlorella(图 2-19-IB),
多生活在有机质丰富的水中,是一种不具鞭毛,不能运动的单细胞藻类。用吸管吸一小滴小球藻水液制成临时装片(或永久玻片),在显微镜下观察,藻体很微小,杆高倍镜下也只能看见球形或椭圆形的形状。一个叶绿体,片状弯生,但往往只能从细胞内发亮的凹处来辨别。
3 团藻属 Volvox( 图 2-I9-IC)
隶属于团藻目,团藻科。该属是团藻目中最进化的类型。藻体是由数百至上万个衣藻型细胞组成的多细胞空心球体,各细胞间以胞间连丝相连。植物体有前后端分化,其后端有些细胞分化为较大的生殖胞。团藻多在春夏季生长于淡水池塘或临时积水坑中。用吸管吸取团藻水样制成临时水装片(或用永久装片),在显微镜下观察它们的形态结构、运动方式、细胞数目,并注意观察体内是否有第一代甚至第二代子群体,理解其无性生殖和有性生殖过程。
4 水绵属 Spirogyra(图 2-19-2)
隶属于双星藻目,双星藻科。植物体由长圆柱形细胞形成不分枝的丝状体,具 1 至多条带状载色体和接合生殖方式,是最常见的丝状绿藻,广布于池塘、沟渠、稻田中,常成团生于水底或漂浮于水面。碧绿色手触有滑腻感(细胞壁外层有较多果胶质),-年四季均可采到。
用镊子取几条水绵制成临时水装片(注意用解剖针拔散开),在显微镜下观察以下特征:
(1) 藻体形态与细胞结构低倍镜下观察,可见水绵为单列细胞组成的才分枝的丝状体,最明显的特征是每个细胞中都有螺旋绕生的带状载色体。不同种类载色体条数不同,从1条到多条,每条载色体上有一列发亮的蛋白核。用 I-KI 溶液染色后置高倍镜下观察,可看到若褐色的细胞壁和着淡黄色的贴壁分布的细胞质。把光线调暗,调节细准焦旋钮,可看到分布丁细胞中央的黄色细胞核(注意与蛋白核区分)。仔细观察,还可看到中央原生质和周围细胞质由原生质丝穿越大液泡彼此相连。
(2)接合生殖
水绵多在春秋季节发生接合生殖,这时藻体由绿色变为黄绿色,且常成片漂浮在水面上。若将所采新鲜材料的瓶子正对阳光,用放大镜观察,丝状体上褐色的斑点即为合子,说明水绵正在进行接合生殖。用镊子取几条有接合生殖的水绵制成临时水装片(或水绵接合生殖永久玻片),置于显微镜下观察接合生殖的各个时期:
①两条丝状体并列,相对的细胞侧壁产生突起;
②两相对细胞的突起相接,横壁溶解形成接合管,各形成一个配子。同时,两相对细胞的原生质体浓缩,
③-条丝状体中的每个细胞(雄配子囊)内的配子以变形虫式的运动,通过接合管流入另一丝状体的细胞(雌配子囊)中,
④一条丝状体内的细胞内全部形成合子,另一条丝状体的细胞全部为空壁,特称梯状接合。有时还可看到单条藻丝相邻细胞的侧面接合情况。观察成熟的合子的形状、颜色和壁上的纹饰。
5 丝藻属 Ulothrix
隶属于丝藻目,丝藻科。多固着生长在清洁流水的石头或水中其他物体上,丛生呈深绿色绒毡状。采集时需用小刀从固若物上刮下,以保持固着器的完整。用摄子取少量藻体制成临时水装片,在显微镜下观察以下特征(图 2-19-3):
(1)藻体形念和细胞结构:丝藻为单列细胞组成的不分枝的丝状体。
6. 其他绿藻门植物的观察
观察石莼属、盘藻属、空球藻属、栅藻属、刚毛藻属、水网藻属、双星藻属、新月藻属新鲜材料(或水久制片}以及腊叶标本。
来源:丁香实验