用梯度盐透析的方法组装核小体串实验
最新修订时间:
材料与仪器
非标记的 G5E4 DNA 末端标记的 G5E4 DNA 牛血清白蛋白(BSA)
高盐缓冲液 低盐缓冲液
高盐缓冲液 低盐缓冲液
步骤
1. 准备如下的重组混合液(最后加入组蛋白):
约 100 ug/ml 9 份未标记和 1 份末端标记(摩尔数比)的 G5E4 DNA 混合物
20 mmol/L Tris·Cl, pH 7.7
10 mmol/L DTT
2 mol/L NaCl
0.5 mol/L 苄脒
约 100 ug/ml 组蛋白
100 ug/ml BSA
混匀后,4℃ 组装 30 min。
2. 按照分离单核小体的方法使用盐梯度透析重组混合液(此处为 NaCl)。
3. 通过 ECORI 消化分析组装的情况。
来源:丁香实验