原理
用去污剂去除基质形成细胞后汇合单层（postoonfluent monolayer），洗涤培养瓶或培养皿，然后在残留的基质上培养所需要的细胞。
材料与仪器
3T3小鼠成纤维细胞 MCR-5人成纤维细胞 CPAE牛肺动脉内皮细胞或其他任何适于产生细胞外基质的细胞系.
无菌超纯水(UPW)、灭菌的 l% TritonX一100
培养瓶或培养皿
无菌超纯水(UPW)、灭菌的 l% TritonX一100
培养瓶或培养皿
步骤
材料
3T3小鼠成纤维细胞、MCR-5人成纤维细胞、CPAE牛肺动脉内皮细胞或其他任何适于产生细胞外基质的细胞系.
无菌超纯水(UPW).
灭菌的 l% TritonX一100和UPW.
操作步骤
1.培养产生基质的细胞至长满培养器皿.
2.3—5天后达到汇合,除去培养基,加入等体积的UPW配制的无菌 1% TritonX一100于单层细胞上.
3.在 37℃ 下孵育 30min.
4.去除TritonX-100溶液,用等体积的UPW冲洗3次.
5,培养瓶或培养皿可直接被使用,也可放置在4℃下,于3周之内使用完毕.
3T3小鼠成纤维细胞、MCR-5人成纤维细胞、CPAE牛肺动脉内皮细胞或其他任何适于产生细胞外基质的细胞系.
无菌超纯水(UPW).
灭菌的 l% TritonX一100和UPW.
操作步骤
1.培养产生基质的细胞至长满培养器皿.
2.3—5天后达到汇合,除去培养基,加入等体积的UPW配制的无菌 1% TritonX一100于单层细胞上.
3.在 37℃ 下孵育 30min.
4.去除TritonX-100溶液,用等体积的UPW冲洗3次.
5,培养瓶或培养皿可直接被使用,也可放置在4℃下,于3周之内使用完毕.
注意事项
培养瓶或培养皿可直接被使用,也可放置在4℃下,于3周之内使用完毕。
来源：丁香实验
