材料与仪器
步骤
一、需氧培养法：本法是临床细菌室最常用的培养方法，适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃，这适合于绝大多数致病菌的生长。此外，还有用 4℃ 培养，如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长，而其他革兰氏阳性菌则不能，故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃ 培养时有动力，胎儿弯曲菌则可以在 25℃ 中生长。
二、二氧化碳培养法：有些细菌如脑膜炎奈瑟氏菌，淋病奈瑟氏菌和布鲁杆菌，初次从临床标本中分离时，都需要有 5％ 一 10％ 的 CO。环境，这些菌才生长良好。通常需供给 COZ 的方法有：
1、M 氧化碳培养箱：是一台特制箱子，即能调节 CO2 的含量，又能调节所需的温度（一般为 35-37℃），CO2 是用钢瓶定期充有 99.99％ 含量的 CO2，再将此钢瓶与 CO2 培养箱的 CO2 运送管连接，钢瓶上的真空表可以指示 CO2 输出量，此法可供大型实验室应用。
2、烛缸法：将己接种好的平板或试管培养基，置入干燥器内，并放入点燃的蜡烛。干燥器盖的边缘涂上凡士林，盖上盖子，烛光经几分钟后自行熄灭，此时干燥器内的 CO2 含量约占 5-10％，再将放有培养物的干燥器置 37℃ 培养箱中培养。
3、化学法：常用碳酸氢钠盐酸法。按每升容积称取碳酸氢钠 0.4 g，浓盐酸 0.35 ml 的比例，分别置入容器内，将容器放入干燥器内，待放好培养物后，盖紧干燥器的盖子，倾斜容器使浓盐酸与碳酸氢钠接触生成 CO2。
三、厌氧培养法：本法适用于专性厌氧菌的培养。其方法有化学法、生物学方法以及综合方法。常用的厌氧法有：
l、庖肉培养基法：用马肉或牛肉渣加适量肉汤制备而成，适用于所有厌氧菌特别是梭状芽胞杆菌的培养。
2、焦性没食子酸：在一清洁的玻璃板上放置一块消毒沙布，在沙布上加少量焦性没食子酸和 KOH（NaOH）。立即盖上己接种标本的平板培养基，平板四周用石蜡封住，阻止氧气进人。待上述药品起化学反应后，可吸收氧气，造成厌氧环境。
此法简便，适用于一般实验室，但该化学反应中产生的焦性没食子碱，对细菌有一定毒性作用，故分离率不高。
3、厌氧罐法：利用能密封的罐子，以物理或化学方法造成无氧环境。常用抽气换气法和冷触媒法。前者抽出罐内空气，充入氮气，如此反复三次，最后充入 10％H2，10％CO2，80％N2 的混合气体，并用钯为触媒，催化 O2 与 H2 化合成水，达到厌氧环境。罐内置美兰指示液，有氧时美兰呈兰色，无氧时被还原为无色。后者在厌氧罐内放置产气袋，袋内装有硼氢化钾，碳酸氢钠和枸橼酸制成的药片，使用时剪开上角，加入 10 ml 水，立即盖好罐盖，扭紧固定卡，此时由气袋内产生的 H2，在事先放人罐内的靶粒催化下，与同罐内的 O2 结合成水，10-30s 即见罐盖和罐壁上出现水滴，罐内厌氧条件由液体美兰指示剂指示。此法效果好，适用于大、中型实验室。
4、气袋法：将接种好的平板培养基，置入特制的塑料气袋中，并密封袋口，其厌氧原理同厌氧法的冷触媒法。此法简便，宜用于床边接种和基层实验室。
二、二氧化碳培养法：有些细菌如脑膜炎奈瑟氏菌，淋病奈瑟氏菌和布鲁杆菌，初次从临床标本中分离时，都需要有 5％ 一 10％ 的 CO。环境，这些菌才生长良好。通常需供给 COZ 的方法有：
1、M 氧化碳培养箱：是一台特制箱子，即能调节 CO2 的含量，又能调节所需的温度（一般为 35-37℃），CO2 是用钢瓶定期充有 99.99％ 含量的 CO2，再将此钢瓶与 CO2 培养箱的 CO2 运送管连接，钢瓶上的真空表可以指示 CO2 输出量，此法可供大型实验室应用。
2、烛缸法：将己接种好的平板或试管培养基，置入干燥器内，并放入点燃的蜡烛。干燥器盖的边缘涂上凡士林，盖上盖子，烛光经几分钟后自行熄灭，此时干燥器内的 CO2 含量约占 5-10％，再将放有培养物的干燥器置 37℃ 培养箱中培养。
3、化学法：常用碳酸氢钠盐酸法。按每升容积称取碳酸氢钠 0.4 g，浓盐酸 0.35 ml 的比例，分别置入容器内，将容器放入干燥器内，待放好培养物后，盖紧干燥器的盖子，倾斜容器使浓盐酸与碳酸氢钠接触生成 CO2。
三、厌氧培养法：本法适用于专性厌氧菌的培养。其方法有化学法、生物学方法以及综合方法。常用的厌氧法有：
l、庖肉培养基法：用马肉或牛肉渣加适量肉汤制备而成，适用于所有厌氧菌特别是梭状芽胞杆菌的培养。
2、焦性没食子酸：在一清洁的玻璃板上放置一块消毒沙布，在沙布上加少量焦性没食子酸和 KOH（NaOH）。立即盖上己接种标本的平板培养基，平板四周用石蜡封住，阻止氧气进人。待上述药品起化学反应后，可吸收氧气，造成厌氧环境。
此法简便，适用于一般实验室，但该化学反应中产生的焦性没食子碱，对细菌有一定毒性作用，故分离率不高。
3、厌氧罐法：利用能密封的罐子，以物理或化学方法造成无氧环境。常用抽气换气法和冷触媒法。前者抽出罐内空气，充入氮气，如此反复三次，最后充入 10％H2，10％CO2，80％N2 的混合气体，并用钯为触媒，催化 O2 与 H2 化合成水，达到厌氧环境。罐内置美兰指示液，有氧时美兰呈兰色，无氧时被还原为无色。后者在厌氧罐内放置产气袋，袋内装有硼氢化钾，碳酸氢钠和枸橼酸制成的药片，使用时剪开上角，加入 10 ml 水，立即盖好罐盖，扭紧固定卡，此时由气袋内产生的 H2，在事先放人罐内的靶粒催化下，与同罐内的 O2 结合成水，10-30s 即见罐盖和罐壁上出现水滴，罐内厌氧条件由液体美兰指示剂指示。此法效果好，适用于大、中型实验室。
4、气袋法：将接种好的平板培养基，置入特制的塑料气袋中，并密封袋口，其厌氧原理同厌氧法的冷触媒法。此法简便，宜用于床边接种和基层实验室。
来源：丁香实验
