原理
主要是蛋白胨和牛肉粉用来提供细菌生长所需的碳源、氮源、氨基酸以及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血提供氯化血红素和辅酶I,为嗜血杆菌属的生长提供特殊营养。
巧克力平板培养基还能够培养其他细菌,主要的原因是血液中有V、X因子,这两种因子是位于红细胞中的,一般细菌不能利用,轻微的加热(一般为75~85摄氏度左右)使红细胞破坏释放到细胞外方可利用。
材料与仪器
蛋白胨 牛肉粉 氯化钠 琼脂 蒸馏水
玻璃平皿 量筒 高压蒸气锅 pH计 85℃水浴锅 超净工作台 称量天平
步骤
一、巧克力平板主要成分
1. 以羊血制备
蛋白胨 10g
牛肉粉 3g
氯化钠 5g
脱纤维羊血 50mL
琼脂 15g
蒸馏水 1000mL
2.以兔血制备
鲜牛肉浸出液 1000mL
蛋白胨 10g
氯化钠 5g
脱纤维兔血 100mL
琼脂 15g
二、巧克力平板制备
1. 将除脱纤维羊血(兔血)外的主要成分混合,校正pH在7.2——7.4,高压灭菌后,冷却至85℃。
2. 无菌方法加入脱纤维羊血(兔血),摇匀后置于85℃水浴中,维持该温度10分钟,使之成巧克力色。
3. 取出,置于室温冷却至约50℃,倾制平板。
注意事项
2. pH值应在7.2±0.2。
3. 无菌要求:将巧克力平板培养基置于37℃±2℃培养箱中培养7天,不得有菌生长。
常见问题
来源:丁香实验