原理
血浆(清)中加人过量的标准盐酸溶液,使酸与HCO3-起中和反应,释放出CO2然后以标准的氢氧化钠滴定剩余的盐酸,以氢氧化钠的耗量计算出血浆HCO3-的含量,以血浆(清)原来的PH作为滴定的终点。
材料与仪器
步骤
一、实验试剂:
1. 0.01mol/L盐酸:取精确标定的1.00mol/L盐酸溶液1.0ml,移至100ml容量瓶中,用生理盐水稀释至刻度。
2. 0.01mol/L氢氧化钠:取精确标定的100mol/L氢氧化钠1.0ml移至100ml容量瓶中,用生理盐水稀释至刻度,此液应密闭保存,约可用1周。
3. 酚红指示剂:称取酚红50mg,加0.01mol/L氢氧化钠14.1ml,研磨溶解后,加生理盐水至250ml。
4. 生理盐水
二、实验操作:取小试管2支,标明测定管及对照管,各管加入新鲜血浆(或血清)0.1ml,酚红指示剂2滴,对照管中加人生理盐水2.5ml,测定管中准确加入0.01mol/L盐酸0.5ml。振摇1分钟,使CO2逸出,再加生理盐水2ml,混匀,然后用微量滴定管将0.01mol/L氢氧化钠逐滴加人,滴至与对照管同样颜色为终点。
三、计算:
血清(浆)HCO3-mmol/L=(0.5-滴定用0.01mol/L氢氧化钠ml数)×0.01×(1000/0.1)
参考值:HCO3-成人:20-29 mmol/L
儿童:18-27 mmol/L
1. 0.01mol/L盐酸:取精确标定的1.00mol/L盐酸溶液1.0ml,移至100ml容量瓶中,用生理盐水稀释至刻度。
2. 0.01mol/L氢氧化钠:取精确标定的100mol/L氢氧化钠1.0ml移至100ml容量瓶中,用生理盐水稀释至刻度,此液应密闭保存,约可用1周。
3. 酚红指示剂:称取酚红50mg,加0.01mol/L氢氧化钠14.1ml,研磨溶解后,加生理盐水至250ml。
4. 生理盐水
二、实验操作:取小试管2支,标明测定管及对照管,各管加入新鲜血浆(或血清)0.1ml,酚红指示剂2滴,对照管中加人生理盐水2.5ml,测定管中准确加入0.01mol/L盐酸0.5ml。振摇1分钟,使CO2逸出,再加生理盐水2ml,混匀,然后用微量滴定管将0.01mol/L氢氧化钠逐滴加人,滴至与对照管同样颜色为终点。
三、计算:
血清(浆)HCO3-mmol/L=(0.5-滴定用0.01mol/L氢氧化钠ml数)×0.01×(1000/0.1)
参考值:HCO3-成人:20-29 mmol/L
儿童:18-27 mmol/L
注意事项
1. 血液标本应避免与空气接触并迅速分离血浆及时操作。
2. 所有器皿必须中性,否则影响结果。
3. 0.0lmol/L氢氧化钠不稳定,应密封保存,避免吸收CO20,0.01mol/L盐酸比较稳定,故每天应做校正滴定,用酚红作指示剂,以红色出现10秒而不褪色做为终点测定结果,也相比前两者含量很少。
4. 生理盐水必须中性,偏酸或偏碱均会影响结果的准确性。
2. 所有器皿必须中性,否则影响结果。
3. 0.0lmol/L氢氧化钠不稳定,应密封保存,避免吸收CO20,0.01mol/L盐酸比较稳定,故每天应做校正滴定,用酚红作指示剂,以红色出现10秒而不褪色做为终点测定结果,也相比前两者含量很少。
4. 生理盐水必须中性,偏酸或偏碱均会影响结果的准确性。
来源:丁香实验