原理
火焰光度分析法,是一种发射光谱分析法,被测溶液经压缩空气雾化后于可燃气体混合后燃烧成火焰,由火焰激发后,各元素可发射出特有的光谱,由于火焰的激发能量较低,故被激发的元素只现于碱金属与碱土金属。钾的光谱是暗红色,其波长为765nm,Na的光谱是黄色,其波长为589nm。溶液中的金属元素浓度愈大,所发射的光谱愈强,因此在一定的激发条件下,例如可燃气体与压缩空气的压力与标本液的流速等因素保持一致,则溶液的浓度与火焰光度计检测流计的指针读数成正比,通过与己知浓度的标准液进行比较,便可求出标本中钾或钠的浓度。
材料与仪器
HG-Ⅲ型火焰光度计 HG-5型火焰光度计
步骤
一、 实验仪器:HG-Ⅲ型火焰光度计或HG-5型火焰光度计
主机部分:光路控制系统,喷雾燃烧室,电子检测系统,光学和测量系统分为钾钠两套,应同时测得两者的结果,配套件包括空气压缩机,分水滤气器,煤气稳定器,汽油汽化缸,可使用煤气,被化石油气,汽油等几种燃料。
二、实验试剂:
1. 钾标准储存液(10mol/L);取氯化钠(GR或AR)数克,置于称量瓶中,于120℃烤箱中干燥至恢复,取出置玻璃干燥器内冷置室温,称取0.7456克,用去离子水浴解,移去1000ml容量瓶中,再以去离子水稀释至刻度,储于塑料瓶中,置冰箱保存。
2. 钠标准储存液(l00mmol/L)取氯化钠(GR或AR)数克,在110-120℃烤箱中干燥后,取出置于玻璃干燥器内冷却置室温,准确称取5.845g用去离于水溶解,移入1000ml容量瓶中,以去离子水稀释至刻度,混匀,储于塑料瓶中备用。
3. 混合标本应用液(钾 0.04mmol/L;钠 1.4mmol/L)准确吸取钾标准液4ml,钠标准液14ml,置于100ml容量瓶中,以去离子水稀释至刻度,温匀,储于塑料瓶中备用。
三、实验操作;
l. 稀释血清:取血清0.1ml置于大试管中,加去离子水9.9ml,充分混匀, 供钾. 钠测定用。
2. 仪器准备:
① 连接光路,启动空气压缩机,接通电源。
② 打开点火,调节火焰至最佳状态。
③ 仪器预热,预热时间约二十分钟左右。
④ 仪器校正,调零及调满度。
3. 血清样品测定:
钾和钠可同时测定,测定用去离子水重复调零及用混合标准液重复调满度几次,若钾. 钠两个检流计指针均无漂移,便可将稀释过的血清样品放在进样管下 端开始进样。读取测定读数,然后用去离子水重新进样冲洗管道,之后进行一份 血清样品测定。连续测试多份样品时,应在每3-5份样品之间进行一次标准液校正,样品间可用去离子水调零冲洗,以排除样品的相互干扰,持测定完毕后,用去离子水冲洗管道并关机。
四、计算:
(钾样品读数/钾标准液读数)×4=血清钾mmol/L
(钠样品读数/钠标准液读数)×140=血清钠mmol/L
参考值:血清钠:136-145 mmol/L
血清钾:3.5一5.3 mmol/L
主机部分:光路控制系统,喷雾燃烧室,电子检测系统,光学和测量系统分为钾钠两套,应同时测得两者的结果,配套件包括空气压缩机,分水滤气器,煤气稳定器,汽油汽化缸,可使用煤气,被化石油气,汽油等几种燃料。
二、实验试剂:
1. 钾标准储存液(10mol/L);取氯化钠(GR或AR)数克,置于称量瓶中,于120℃烤箱中干燥至恢复,取出置玻璃干燥器内冷置室温,称取0.7456克,用去离子水浴解,移去1000ml容量瓶中,再以去离子水稀释至刻度,储于塑料瓶中,置冰箱保存。
2. 钠标准储存液(l00mmol/L)取氯化钠(GR或AR)数克,在110-120℃烤箱中干燥后,取出置于玻璃干燥器内冷却置室温,准确称取5.845g用去离于水溶解,移入1000ml容量瓶中,以去离子水稀释至刻度,混匀,储于塑料瓶中备用。
3. 混合标本应用液(钾 0.04mmol/L;钠 1.4mmol/L)准确吸取钾标准液4ml,钠标准液14ml,置于100ml容量瓶中,以去离子水稀释至刻度,温匀,储于塑料瓶中备用。
三、实验操作;
l. 稀释血清:取血清0.1ml置于大试管中,加去离子水9.9ml,充分混匀, 供钾. 钠测定用。
2. 仪器准备:
① 连接光路,启动空气压缩机,接通电源。
② 打开点火,调节火焰至最佳状态。
③ 仪器预热,预热时间约二十分钟左右。
④ 仪器校正,调零及调满度。
3. 血清样品测定:
钾和钠可同时测定,测定用去离子水重复调零及用混合标准液重复调满度几次,若钾. 钠两个检流计指针均无漂移,便可将稀释过的血清样品放在进样管下 端开始进样。读取测定读数,然后用去离子水重新进样冲洗管道,之后进行一份 血清样品测定。连续测试多份样品时,应在每3-5份样品之间进行一次标准液校正,样品间可用去离子水调零冲洗,以排除样品的相互干扰,持测定完毕后,用去离子水冲洗管道并关机。
四、计算:
(钾样品读数/钾标准液读数)×4=血清钾mmol/L
(钠样品读数/钠标准液读数)×140=血清钠mmol/L
参考值:血清钠:136-145 mmol/L
血清钾:3.5一5.3 mmol/L
注意事项
1. 火焰一定要调至最佳状态,仪器要经预热稳定后方可测试,否则影响读数 数的稳定性和重复性。
2. 使用仪器时要注意防火,且关机步骤要明确,正确的关机方法是关空气压缩机,让气焰自然熄灭,后再切断电压,然后关闭燃起针阀及进样开关。
3. 火焰光度法测钾. 钠时线性范围在20ppm左右,随浓度增加会产生自吸收现象(自蚀)而影响结果的准确性,故应将样品稀释,临床上将血清稀释100倍,兼作钾. 钠的测定。
4. 仪器应保持在室温,无强光,无震动,无尘埃的环境下,因火焰受气压. 流量. 燃料. 温度的影响很大。
5. 使用煤气或液化石油气时应先关燃起电源后,然后再关其他开关。
6. 血样样品不能溶血。
2. 使用仪器时要注意防火,且关机步骤要明确,正确的关机方法是关空气压缩机,让气焰自然熄灭,后再切断电压,然后关闭燃起针阀及进样开关。
3. 火焰光度法测钾. 钠时线性范围在20ppm左右,随浓度增加会产生自吸收现象(自蚀)而影响结果的准确性,故应将样品稀释,临床上将血清稀释100倍,兼作钾. 钠的测定。
4. 仪器应保持在室温,无强光,无震动,无尘埃的环境下,因火焰受气压. 流量. 燃料. 温度的影响很大。
5. 使用煤气或液化石油气时应先关燃起电源后,然后再关其他开关。
6. 血样样品不能溶血。
来源:丁香实验