原理
钨酸法
实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。
三氯醋酸法
实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除去,上清液为无蛋白血滤液.
实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。
三氯醋酸法
实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除去,上清液为无蛋白血滤液.
材料与仪器
新鲜鸡血
10%钨酸钠溶液 1 3 mol L硫酸溶液
锥形瓶 移液管
10%钨酸钠溶液 1 3 mol L硫酸溶液
锥形瓶 移液管
步骤
一、钨酸法
实验试剂:
1. 100g/L钨酸钠溶液:称取钨酸钠100g,溶于水中加水至1000ml
2. 1/3M硫酸:取己标定的当量硫酸2份加水1份混合。
实验操作:
用吸管将全血缓慢放入蒸馏水中,每次加入试剂后充分混匀,静止10分钟后离心,取上清液备用.
二、三氯醋酸法
实验试剂:100 g/L三氯醋酸溶液
实验操作:取血清或血浆一份,三氯醋酸9份,加入血清或血浆中(边加边摇).充分混匀后离心,取上法备用.
实验试剂:
1. 100g/L钨酸钠溶液:称取钨酸钠100g,溶于水中加水至1000ml
2. 1/3M硫酸:取己标定的当量硫酸2份加水1份混合。
实验操作:
用吸管将全血缓慢放入蒸馏水中,每次加入试剂后充分混匀,静止10分钟后离心,取上清液备用.
二、三氯醋酸法
实验试剂:100 g/L三氯醋酸溶液
实验操作:取血清或血浆一份,三氯醋酸9份,加入血清或血浆中(边加边摇).充分混匀后离心,取上法备用.
注意事项
一、钨酸法
1. 抗凝血中草酸盐过剩时,蛋白质沉淀不完全,沉淀不能变为暗褐色,此时可滴加100g/L硫酸一滴,摇匀,至沉淀变为暗褐色再进行过滤。
2. 除蛋白滤液不透明时,应将蛋白质沉淀及滤液倾回试管,按1所示方法加人硫酸,使蛋白质完全沉淀。
3. 此滤液适于葡萄糖、肌酐、肌酸、尿酸等测定.
二、三氯醋酸法
1. 此法所得滤液量多,酸性较强,适于较强酸性溶解的物质定测定,如钙. 磷等。
2. 不适于碱性还原法血糖定量测定。
3. 三氯醋酸易潮解,注意保存.
1. 抗凝血中草酸盐过剩时,蛋白质沉淀不完全,沉淀不能变为暗褐色,此时可滴加100g/L硫酸一滴,摇匀,至沉淀变为暗褐色再进行过滤。
2. 除蛋白滤液不透明时,应将蛋白质沉淀及滤液倾回试管,按1所示方法加人硫酸,使蛋白质完全沉淀。
3. 此滤液适于葡萄糖、肌酐、肌酸、尿酸等测定.
二、三氯醋酸法
1. 此法所得滤液量多,酸性较强,适于较强酸性溶解的物质定测定,如钙. 磷等。
2. 不适于碱性还原法血糖定量测定。
3. 三氯醋酸易潮解,注意保存.
常见问题
本实验来源于牡丹江医学院《检验专业实验指导》。
来源:丁香实验