原理
苏丹黑(Sudan black B,SB)是一种脂溶性染料,可溶解于细胞浆内的含脂结构中,使胞浆中的脂类物质呈棕黑色或深黑色颗粒。
材料与仪器
细胞浆
福尔马林液 苏丹黑酒精溶液
福尔马林液 苏丹黑酒精溶液
步骤
一、实验试剂:
1. 福尔马林液
2. 苏丹黑酒精溶液
(1)贮备液:苏丹黑B 0.3g溶于100毫升纯酒精中,在室温中经常振摇,数天后完全溶解;
(2)缓冲液:16克酚溶于30毫升纯酒精中,再与含0.3克磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)的 100毫升蒸馏水混合.
(3)染色液:将贮备液60毫升与缓冲波40毫升相混合,过滤可用数周。
3. 70%乙醇
4. 瑞氏染液
三、实验方法:
l. 充分干燥的涂片在福尔马林蒸气中固定5-10分钟;
2. 流水冲洗5-10分钟
3 .置于苏丹黑染色液中浸30分钟.
4. 以70%乙醇迅速清洗.
5. 自来水冲洗1分钟。
6. 瑞氏染色复染。
四、实验结果:
阳性反应是棕黑或深黑色颗粒,定位于胞浆中,粒细胞与单核细胞系列呈阳性反应.粒系中,原粒细胞一般阳性,也可弱阳性,早幼粒以下各期细胞随着成熟而阳性程度逐渐加强,中性粒细胞的颗粒大小均匀,与过氧化物酶颗粒相似;嗜酸粒细胞的颗粒较大,着色偏棕,有泡沫状感,嗜碱粒细胞颗粒大小不等。单核细胞胞浆中颗粒较小,不规则,分布弥散,有的盖于核上,淋巴细胞系列呈阴性反应,红细胞系、类巨核细胞和血小板阴性.
1. 福尔马林液
2. 苏丹黑酒精溶液
(1)贮备液:苏丹黑B 0.3g溶于100毫升纯酒精中,在室温中经常振摇,数天后完全溶解;
(2)缓冲液:16克酚溶于30毫升纯酒精中,再与含0.3克磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)的 100毫升蒸馏水混合.
(3)染色液:将贮备液60毫升与缓冲波40毫升相混合,过滤可用数周。
3. 70%乙醇
4. 瑞氏染液
三、实验方法:
l. 充分干燥的涂片在福尔马林蒸气中固定5-10分钟;
2. 流水冲洗5-10分钟
3 .置于苏丹黑染色液中浸30分钟.
4. 以70%乙醇迅速清洗.
5. 自来水冲洗1分钟。
6. 瑞氏染色复染。
四、实验结果:
阳性反应是棕黑或深黑色颗粒,定位于胞浆中,粒细胞与单核细胞系列呈阳性反应.粒系中,原粒细胞一般阳性,也可弱阳性,早幼粒以下各期细胞随着成熟而阳性程度逐渐加强,中性粒细胞的颗粒大小均匀,与过氧化物酶颗粒相似;嗜酸粒细胞的颗粒较大,着色偏棕,有泡沫状感,嗜碱粒细胞颗粒大小不等。单核细胞胞浆中颗粒较小,不规则,分布弥散,有的盖于核上,淋巴细胞系列呈阴性反应,红细胞系、类巨核细胞和血小板阴性.
来源:丁香实验