材料与仪器
步骤
一、细胞总数
1、直接计数法 csf标本观察,清亮或仅微混,可用此法用滴管吸取已摇匀csf标本少许直接充入计数板计数室内,静置2-3分钟低倍镜下计数两个计数池四角和中央共10大格内细胞数,即1微升csf的细胞总数。
2、稀释计数法 如标本中cell过多,可用生理盐水和RBC稀释液稀释按上法计数,结果乘以稀释倍数。
二、白细胞计数
1、直接计数法:用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管避附着少量冰乙酸,然后用同一吸管吸少量混匀的csf标本,数分钟后RBC溶解,再充入计数室内,按上法计数.
2、如WBC过多,用WBC稀释液稀释.按上法计数,结果乘以稀释倍数.
三、WBC分类计数:
l、直接分类法;WBC直接计数后,转高倍镜观察,依细胞形态和细胞核的形态,共计WBC 100个分别计算单个核细胞和多核cell比例,以分数表示之,若WBC不足100个可直接写单个核细胞和多核cell的个数,若WBC总数在30以下,可不做分类计数。
2、染色分类法 将csf标本离心,取沉淀涂片,制成均匀薄膜.置于室温或37℃温箱内,干燥后Wright染色,油镜下分类计数.
1、直接计数法 csf标本观察,清亮或仅微混,可用此法用滴管吸取已摇匀csf标本少许直接充入计数板计数室内,静置2-3分钟低倍镜下计数两个计数池四角和中央共10大格内细胞数,即1微升csf的细胞总数。
2、稀释计数法 如标本中cell过多,可用生理盐水和RBC稀释液稀释按上法计数,结果乘以稀释倍数。
二、白细胞计数
1、直接计数法:用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管避附着少量冰乙酸,然后用同一吸管吸少量混匀的csf标本,数分钟后RBC溶解,再充入计数室内,按上法计数.
2、如WBC过多,用WBC稀释液稀释.按上法计数,结果乘以稀释倍数.
三、WBC分类计数:
l、直接分类法;WBC直接计数后,转高倍镜观察,依细胞形态和细胞核的形态,共计WBC 100个分别计算单个核细胞和多核cell比例,以分数表示之,若WBC不足100个可直接写单个核细胞和多核cell的个数,若WBC总数在30以下,可不做分类计数。
2、染色分类法 将csf标本离心,取沉淀涂片,制成均匀薄膜.置于室温或37℃温箱内,干燥后Wright染色,油镜下分类计数.
注意事项
csf采集后应在1小时内计数,如搁置过久cell破坏或沉淀纤维Pr凝集成块,可导致计数不准.
(1)穿刺损伤血管导致血性csf此时cell总数计数无意义,做校正如下:将混匀的csf用1%冰乙酸稀释后为排出血性csf的RBC影响,校正如下:
校正后csfWBC总数=未校正scfWBC总数-(csf中RBCx周围中WBC/周围血中RBC数).
(2)细胞计数时,如发现较多RBC有皱缩,肿胀现象应报告.
(3)细胞计数时,应注意RBC上LC与新型隐球菌相区别.
(4)涂片固定时间不能太长.
(1)穿刺损伤血管导致血性csf此时cell总数计数无意义,做校正如下:将混匀的csf用1%冰乙酸稀释后为排出血性csf的RBC影响,校正如下:
校正后csfWBC总数=未校正scfWBC总数-(csf中RBCx周围中WBC/周围血中RBC数).
(2)细胞计数时,如发现较多RBC有皱缩,肿胀现象应报告.
(3)细胞计数时,应注意RBC上LC与新型隐球菌相区别.
(4)涂片固定时间不能太长.
来源:丁香实验